| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 流感病毒的分子生物学 | 第11-14页 |
| 1.1.1 流感病毒的形态结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 流感病毒编码蛋白及功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 流感病毒的复制 | 第13页 |
| 1.1.4 流感病毒的遗传与变异 | 第13-14页 |
| 1.2 流感病毒反向遗传操作系统的发展史及应用 | 第14-15页 |
| 1.2.1 借助辅助病毒拯救流感病毒 | 第14页 |
| 1.2.2 利用克隆的基因拯救流感病毒 | 第14页 |
| 1.2.3 在病毒基因功能研究中的应用 | 第14-15页 |
| 1.3 猪流感的流行病学 | 第15-16页 |
| 1.3.1 猪流感的流行情况 | 第15页 |
| 1.3.2 猪流感分类情况 | 第15-16页 |
| 1.3.3 猪流感在我国的流行情况 | 第16页 |
| 1.4 猪流感的公共卫生学意义 | 第16-17页 |
| 1.4.1 猪流感的兽医公共卫生学意义 | 第16页 |
| 1.4.2 猪流感的人类公共卫生学意义 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-32页 |
| 2.1 材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 实验室保存材料 | 第17页 |
| 2.1.2 参考基因序列 | 第17页 |
| 2.1.3 主要缓冲液与培养基的配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.5 主要仪器设备和器材 | 第19页 |
| 2.1.6 引物设计与合成 | 第19-21页 |
| 2.1.7 试验动物 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 病毒分离与鉴定 | 第21-23页 |
| 2.2.2 反向遗传8质粒构建 | 第23-26页 |
| 2.2.3 PB2-X ORF的体外验证 | 第26-28页 |
| 2.2.4 PB2突变质粒构建 | 第28页 |
| 2.2.5 病毒拯救 | 第28-30页 |
| 2.2.6 两株病毒生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.7 两株病毒聚合酶活性的测定 | 第31页 |
| 2.2.8 小鼠攻毒实验 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-50页 |
| 3.1 病毒分离结果 | 第32-33页 |
| 3.2 分离病毒的基因扩增与质粒构建结果 | 第33-34页 |
| 3.3 病毒基因序列测定与分析 | 第34-44页 |
| 3.4 分离毒株PB2基因新ORF（PB2-X ORF）的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.4.1 序列分析结果 | 第44页 |
| 3.4.2 PB2-2 ORF体外表达验证结果 | 第44-45页 |
| 3.5 病毒拯救结果 | 第45-46页 |
| 3.6 两株病毒在细胞上复制能力比较结果 | 第46页 |
| 3.7 两株病毒聚合酶活性测定结果 | 第46-47页 |
| 3.8 小鼠攻毒试验结果 | 第47-50页 |
| 3.8.1 小鼠攻毒试验结果 | 第47页 |
| 3.8.2 小鼠肺脏的病毒滴度滴定结果 | 第47-48页 |
| 3.8.3 小鼠血清的血凝抑制实验结果 | 第48页 |
| 3.8.4 小鼠肺脏病理组织切片图 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |