| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 OLFML2A基因在肝癌组织中的表达 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第10-11页 |
| 2 结果 | 第11页 |
| 3 结论 | 第11-12页 |
| 第二章 肝癌细胞株中OLFML2A基因的表达 | 第12-17页 |
| 1 研究对象 | 第12页 |
| 2 主要实验器材 | 第12页 |
| 3 实验方法 | 第12-15页 |
| 3.1 引物名称及序列 | 第12-13页 |
| 3.2 抽提总RNA | 第13页 |
| 3.3 RNA逆转录来获得cDNA | 第13-14页 |
| 3.4 qPCR检测 | 第14-15页 |
| 3.5 数据分析 | 第15页 |
| 4 结果 | 第15-16页 |
| 5 结论 | 第16-17页 |
| 第三章 OLFML2A基因RNAi慢病毒载体制备 | 第17-25页 |
| 1 实验对象 | 第17页 |
| 2 实验材料 | 第17-18页 |
| 3 实验方法 | 第18-22页 |
| 3.1 设计RNA干扰靶点及制备双链DNAoligo | 第19页 |
| 3.2 设计RNA干扰靶点 | 第19页 |
| 3.3 合成DNAoligo序列 | 第19页 |
| 3.4 制备双链DNAoligo | 第19页 |
| 3.5 线性化的载体制备 | 第19-20页 |
| 3.6 构建RNAi慢病毒 | 第20-22页 |
| 4 结果 | 第22-24页 |
| 5 结论 | 第24-25页 |
| 第四章 慢病毒感染BEL-7404细胞及检测OLFML2A基因敲减效率 | 第25-32页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2 实验分组 | 第26页 |
| 3 实验步骤 | 第26-29页 |
| 3.1 感染肝癌BEL-7404细胞 | 第26页 |
| 3.2 检测外源靶点的有效性 | 第26-29页 |
| 4 结果 | 第29-32页 |
| 4.1 慢病毒转染效率的检测 | 第29-30页 |
| 4.2 RT-qPCR检测OLFML2A基因的敲减效率 | 第30-31页 |
| 4.3 WesternBlot检测OLFML2A基因的敲减效率 | 第31-32页 |
| 第五章 OLFML2A基因对肝癌BEL-7404细胞生物学行为的影响 | 第32-39页 |
| 1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2 实验分组 | 第33页 |
| 3 实验步骤 | 第33-34页 |
| 3.1 Celigo法检测BEL-7404细胞的生长 | 第33页 |
| 3.2 FACS法检测BEL-7404细胞的细胞周期 | 第33-34页 |
| 3.3 MTT法检测BEL-7404细胞增殖情况 | 第34页 |
| 3.4 FACS法检测BEL-7404细胞凋亡情况 | 第34页 |
| 4 统计学处理 | 第34-35页 |
| 5 结果 | 第35-38页 |
| 5.1 Celigo检测BEL-7404细胞生长情况 | 第35-36页 |
| 5.2 MTT法检测BEL-7404细胞增殖情况 | 第36-37页 |
| 5.3 FACS法检测BEL-7404细胞周期情况 | 第37页 |
| 5.4 FACS法检测BEL-7404细胞凋亡情况 | 第37-38页 |
| 6 结论 | 第38-39页 |
| 第六章 讨论 | 第39-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 综述一 OLFML2A基因的研究进展 | 第46-51页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述二 肝癌综合治疗的进展 | 第51-60页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
