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Virgibacillus halodenitrificans PDB-F2甘氨酸甜菜碱转运基因的克隆与渗透胁迫响应

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 前言第11-25页
    1.1 研究背景与意义第11-12页
        1.1.1 研究背景第11页
        1.1.2 研究意义第11-12页
    1.2 中度嗜盐菌概述第12-15页
        1.2.1 中度嗜盐菌的定义和分类第12-13页
        1.2.2 中度嗜盐菌的应用第13-14页
        1.2.3 中度嗜盐菌的耐盐机制第14-15页
    1.3 相容性溶质耐盐机制概述第15-22页
        1.3.1 相容性溶质种类和作用机制第15-17页
        1.3.2 相容性溶质耐盐机理第17-19页
        1.3.3 相容性溶质的合成与转运第19-22页
    1.4 相容性溶质转运系统概述第22-24页
        1.4.1 相容性溶质转运系统分类第22-23页
        1.4.2 BCCT转运家族的特点第23页
        1.4.3 相容性溶质转运系统的调控第23-24页
    1.5 研究目的及内容第24-25页
        1.5.1 研究目的第24页
        1.5.2 研究内容第24-25页
第2章 实验材料及分析方法第25-31页
    2.1 实验试剂及配制方法第25-28页
        2.1.1 实验试剂第25-27页
        2.1.2 培养基及其配制第27-28页
        2.1.3 试剂配制及保存第28页
    2.2 实验仪器和设备第28-29页
    2.3 分析方法第29-31页
第3章 甜菜碱对V. halodenitrificans PDB-F2的渗透保护第31-37页
    3.1 引言第31页
    3.2 材料与方法第31-32页
        3.2.1 甜菜碱提取与核磁共振(NMR)分析方法第31-32页
        3.2.2 不同浓度的外源甜菜碱对PDB-F2生长的影响实验第32页
        3.2.3 不同盐度下外源甜菜碱对PDB-F2生长的影响实验第32页
    3.3 结果与讨论第32-36页
        3.3.1 高盐条件下V.halodenitrificans PDB-F2中相容性溶质的积累第32-34页
        3.3.2 不同浓度的外源甜菜碱对V.halodenitrificans PDB-F2生长的影响第34-35页
        3.3.3 外源甜菜碱对V.halodenitrificans PDB-F2耐盐性的影响第35-36页
    3.4 本章小结第36-37页
第4章 甜菜碱转运基因的功能验证及分析第37-58页
    4.1 引言第37-38页
    4.2 材料与方法第38-45页
        4.2.1 菌株、质粒与引物第38-39页
        4.2.2 转运基因对E. coli MKH13的功能互补第39-44页
        4.2.3 功能互补验证第44页
        4.2.4 ~1H-NMR检测相容性溶质第44页
        4.2.5 测定BetL、OpuD1、OpuD2、OpuD3对甜菜碱的亲和力第44-45页
    4.3 结果与讨论第45-56页
        4.3.1 转运基因的PCR扩增与编码产物的特性分析第45-51页
        4.3.2 重组质粒连接转化的PCR验证第51-52页
        4.3.3 功能互补实验第52-53页
        4.3.4 甜菜碱在E.coli MKH13中的积累第53-55页
        4.3.5 BetL、OpuD1、OpuD2、OpuD3对甜菜碱的亲和力第55-56页
    4.4 本章小结第56-58页
第5章 甜菜碱转运基因的渗透胁迫反应第58-71页
    5.1 引言第58页
    5.2 材料与方法第58-62页
        5.2.1 盐度对V.halodenitrificans PDB-F2转运甜菜碱的影响第58-59页
        5.2.2 甜菜碱和NaCl对V. halodenitrificans PDB-F2转运基因的影响第59页
        5.2.3 不同相容性溶质对V.halodenitrificans PDB-F2转运基因的影响第59页
        5.2.4 渗透胁迫对转运过程的控制水平第59页
        5.2.5 生长时期对V.halodenitrificans PDB-F2转运甜菜碱的影响第59页
        5.2.6 总RNA提取与实时荧光定量PCR第59-62页
    5.3 结果与讨论第62-69页
        5.3.1 生长时期对V.halodenitrificans PDB-F2转运甜菜碱的影响第62-64页
        5.3.2 盐度对V.halodenitrificans PDB-F2转运甜菜碱的影响第64-66页
        5.3.3 盐度诱导转运基因betL、opuD1、opuD2和opuD3的转录第66-67页
        5.3.4 转运基因对甜菜碱的转录特异性第67-68页
        5.3.5 V.halodenitrifican PDB-F2中甜菜碱转运过程的控制水平第68-69页
    5.4 本章小结第69-71页
第6章 结论与展望第71-73页
    6.1 结论第71-72页
    6.2 展望第72-73页
参考文献第73-81页
致谢第81-82页
硕士期间相关研究成果第82页

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