| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略词列表 | 第9-10页 |
| 试剂 | 第10-11页 |
| 仪器 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 问题的提出及意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-18页 |
| 1.2.1 小 RNA 的发现及简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 小 RNA 的调控类型 | 第13-14页 |
| 1.2.3 AGO 蛋白的简介及分工 | 第14-15页 |
| 1.2.4 AGO 蛋白的细胞定位 | 第15页 |
| 1.2.5 植物中 RISC 过程的调控 | 第15-17页 |
| 1.2.6 miRNA 概述及生理功能 | 第17-18页 |
| 1.2.7 miR168 与 AGO1 的生理作用 | 第18页 |
| 1.3 本文研究的目的和研究内容 | 第18-20页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第18页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料及方法 | 第20-28页 |
| 2.1 凝胶电泳回收 | 第20页 |
| 2.2 质粒提取 | 第20页 |
| 2.3 Trizol 提取总 RNA | 第20-21页 |
| 2.4 大肠杆菌感受态制备方法 | 第21页 |
| 2.5 大肠杆菌的转化方法 | 第21页 |
| 2.6 农杆菌感受态的制备方法 | 第21-22页 |
| 2.7 农杆菌感受态的转化方法 | 第22页 |
| 2.8 番茄无菌种子获取 | 第22页 |
| 2.9 叶盘法转化番茄 | 第22-23页 |
| 2.10 提取植物基因组 DNA（康为新型植物 DNA 提取试剂盒） | 第23-24页 |
| 2.11 快速提取植物基因组（全式金试剂盒） | 第24页 |
| 2.12 纯合子的筛选方法 | 第24页 |
| 2.13 烟草悬浮细胞培养及转化 | 第24-26页 |
| 2.14 基于 PCR 的定点突变方法 | 第26页 |
| 2.15 种子萌发实验 | 第26页 |
| 2.16 miRNA 定量检测 | 第26-28页 |
| 3 番茄 AGO 基因的分离及鉴定 | 第28-44页 |
| 3.1 番茄 AGO 基因的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 3.2 番茄 AGO 基因的表达模式 | 第29-33页 |
| 3.3 番茄 AGO 全长基因的扩增及 GPF-融合蛋白的构建 | 第33-36页 |
| 3.4 番茄 AGO 基因的基因组定位及系统发育分析 | 第36-38页 |
| 3.5 番茄 AGO 蛋白的保守结构域分析 | 第38-42页 |
| 3.6 番茄 AGO 蛋白的细胞定位 | 第42-44页 |
| 4 转基因番茄的获得及表型观察 | 第44-82页 |
| 4.1. 载体构建及转化 | 第44-51页 |
| 4.1.1 番茄 miR168 功能获得载体的构建 | 第44-47页 |
| 4.1.2 番茄 miR168 功能缺失载体（miR168-sponge 及 miR168-resistant 载体）的构建 | 第47-50页 |
| 4.1.3 转基因番茄的获得、筛选及鉴定 | 第50-51页 |
| 4.2. 转基因表型观察 | 第51-65页 |
| 4.2.1 miR168 及 SlAGO1 共同影响植株生长速度 | 第51-55页 |
| 4.2.2 miR168 及 SlAGO1A 影响生殖器官的发育 | 第55-61页 |
| 4.2.3 部分 miR168-sponge 及 miR168-resistance 出现顶端分生组织异常 | 第61-63页 |
| 4.2.4 miR168 功能缺失植株引起叶片的向上反应 | 第63-65页 |
| 4.3. 转基因在 NPA、ABA 处理下的不同的生理表型 | 第65-67页 |
| 4.3.1 miR168 超表达植株促进茎在生长素抑制剂 NPA 处理下的生长 | 第65-66页 |
| 4.3.2 miR168 影响种子在 ABA 处理下的萌发 | 第66-67页 |
| 4.4. 转基因定量鉴定结果及转基因中与表型相关基因检测 | 第67-76页 |
| 4.4.1 转基因定量鉴定结果 | 第67-71页 |
| 4.4.2 miR168 功能缺失引起 miRNA 的表达变化 | 第71-76页 |
| 4.5. 番茄 miRNA、靶标基因预测及降解组分析 | 第76-82页 |
| 4.5.1 番茄 miRNA 及其靶标基因的预测 | 第76-77页 |
| 4.5.2 番茄降解组测序结果分析 | 第77-79页 |
| 4.5.3 番茄 miRNA、靶标基因在果实发育早期的表达 | 第79-82页 |
| 5 讨论 | 第82-96页 |
| 5.1 番茄中保守的 AGO 蛋白及其功能预测 | 第82-84页 |
| 5.2 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 相互调控 | 第84-85页 |
| 5.3 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 调控幼苗到成苗的转化 | 第85-88页 |
| 5.4 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 调控果实的形成及膨大 | 第88-91页 |
| 5.5 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 调控叶片的向上反应 | 第91-92页 |
| 5.6 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 调控分生组织 | 第92-93页 |
| 5.7 miR168 与 SlAGO1A/SlAGO1B 调控花的数量 | 第93-96页 |
| 6 结论与展望 | 第96-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-112页 |
| 附录 | 第112-137页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第112-113页 |
| B. 番茄降解组分析结果 | 第113-137页 |
