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三叶木通MADS-box家族AktFL1及AktAG1的功能研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
英文缩写词表第11-12页
第1章 文献综述第12-22页
    1.1 被子植物花的性别发育第12-13页
    1.2 被子植物花发育的分子机制研究概述第13-17页
        1.2.1 花发育调控网络概述第13-14页
        1.2.2 花发育模型第14-17页
    1.3 A类及C类基因的研究进展概述第17-20页
        1.3.1 A类及C类基因的结构进化第17-18页
        1.3.2 A类及C类基因的功能进化第18页
        1.3.3 蛋白互作研究技术及其发展第18-20页
    1.4 三叶木通花发育的研究进展第20-22页
        1.4.1 三叶木通花的形态学特征第20页
        1.4.2 三叶木通花发育的分子机制研究第20-21页
        1.4.3 实验室前期工作第21页
        1.4.4 研究意义第21-22页
第2章 三叶木通AktFL1、AktAG1基因的半定量表达研究第22-28页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要实验仪器第22页
        2.1.4 实验准备第22-23页
    2.2 实验方法第23-25页
        2.2.1 三叶木通雌雄花不同时期总RNA的提取第23-24页
        2.2.2 半定量RT-PCR第24-25页
    2.3 结果与分析第25-26页
        2.3.1 总RNA提取质量检测第25-26页
        2.3.2 AktFL1、AktAG1基因的半定量表达结果分析第26页
    2.4 讨论第26-28页
        2.4.1 AktFL1基因的表达分析第26-27页
        2.4.2 AktAG1基因的表达分析第27-28页
第3章 三叶木通AktFL1、AktAG1基因转拟南芥过表达研究第28-46页
    3.1 实验材料第28-29页
        3.1.1 植物材料第28页
        3.1.2 菌株与载体第28页
        3.1.3 主要试剂第28-29页
        3.1.4 主要实验仪器第29页
        3.1.5 引物测序第29页
    3.2 实验方法第29-37页
        3.2.1 三叶木通总RNA的提取第29页
        3.2.2 AktFL1、AktAG1基因ORF的克隆第29-33页
        3.2.3 AktFL1、AktAG1基因过表达载体的构建第33-34页
        3.2.4 重组表达载体质粒转化农杆菌感受态细胞第34-35页
        3.2.5 农杆菌介导转化拟南芥植株第35-36页
        3.2.6 转基因拟南芥植株的鉴定与表型观察第36-37页
    3.3 结果与分析第37-44页
        3.3.1 35S:AktFL1和35S::AktAG1过表达载体的构建第37-40页
        3.3.2 35S::AktFL1转基因植株的分子鉴定第40-41页
        3.3.3 35S::AktAG1转基因植株的分子鉴定第41-42页
        3.3.4 转基因拟南芥植株的表型分析第42-44页
    3.4 讨论第44-46页
        3.4.1 AktFL1基因对花发育的调控功能第44页
        3.4.2 AktAG1基因对花发育的调控功能第44-46页
第4章 三叶木通AktFL1、AktAG1蛋白的亚细胞定位研究第46-56页
    4.1 实验材料第46页
        4.1.1 植物材料第46页
        4.1.2 菌株与载体第46页
        4.1.3 主要试剂第46页
        4.1.4 主要实验仪器第46页
    4.2 实验方法第46-49页
        4.2.1 AktFL1和AktAG1的基因ORF的克隆第46-47页
        4.2.2 瞬时转化烟草细胞第47-48页
        4.2.3 瞬时转化洋葱内表皮细胞第48-49页
    4.3 结果与分析第49-53页
        4.3.1 GFP融合蛋白表达载体的构建第49-51页
        4.3.2 AktFL1、AktAG1蛋白在烟草细胞中的转化分析第51-52页
        4.3.3 AktFL1、AktAG1蛋白在洋葱细胞的转化分析第52-53页
    4.4 讨论第53-56页
第5章 三叶木通AktFL1、AktAG1蛋白的相互作用研究第56-64页
    5.1 实验材料第56页
        5.1.1 植物材料第56页
        5.1.2 菌株与载体第56页
        5.1.3 主要试剂第56页
        5.1.4 主要实验仪器第56页
    5.2 实验方法第56-58页
        5.2.1 双分子荧光互补(BiFC)表达载体的构建第56-57页
        5.2.2 压力注射法瞬时转化烟草细胞第57-58页
    5.3 结果与分析第58-62页
        5.3.1 BiFC表达载体的构建第58-60页
        5.3.2 AktFL1、AktAG1蛋白之间的相互作用第60-62页
    5.4 讨论第62-64页
第6章 结论第64-66页
参考文献第66-78页
致谢第78-80页
攻读硕士学位期间的研究成果第80页

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