| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-29页 |
| 1.1 固定靶标的核酸适配体筛选方法 | 第13-19页 |
| 1.1.1 微珠/磁珠固定法 | 第13-15页 |
| 1.1.2 亲和层析柱固定法 | 第15-16页 |
| 1.1.3 金纳米颗粒固定法 | 第16页 |
| 1.1.4 微孔板固定法 | 第16-17页 |
| 1.1.5 膜固定法 | 第17-18页 |
| 1.1.6 毛细管固定法 | 第18页 |
| 1.1.7 溶胶-凝胶微流控芯片固定法 | 第18-19页 |
| 1.2 固定文库的核酸适配体筛选方法 | 第19-22页 |
| 1.2.1 亲和层析柱固定文库法 | 第20页 |
| 1.2.2 微珠固定文库法 | 第20-22页 |
| 1.3 免固定的核酸适配体筛选方法 | 第22-25页 |
| 1.3.1 硝酸纤维素膜分离法 | 第22-23页 |
| 1.3.2 凝胶电泳分离法 | 第23页 |
| 1.3.3 离心分离法 | 第23页 |
| 1.3.4 毛细管电泳分离法 | 第23-24页 |
| 1.3.5 氧化石墨烯分离法 | 第24-25页 |
| 1.4 测序结果的分析与核酸适配体序列的优化 | 第25-27页 |
| 1.4.1 测序结果的分析 | 第25-27页 |
| 1.4.2 核酸适配体序列的优化 | 第27页 |
| 1.5 本文拟开展的工作 | 第27-29页 |
| 第2章 改进的氧化石墨烯辅助的免固定靶标法用于 C 反应蛋白核酸适配体的筛选 | 第29-45页 |
| 2.1 前言 | 第29页 |
| 2.2 实验部分 | 第29-37页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第29-33页 |
| 2.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定文库及引物质量 | 第33-34页 |
| 2.2.3 文库与氧化石墨烯吸附比例的优化 | 第34页 |
| 2.2.4 C 反应蛋白核酸适配体的筛选过程 | 第34-37页 |
| 2.2.5 高通量测序及结果分析 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 2.3.1 筛选流程 | 第37-39页 |
| 2.3.2 文库及引物质量鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 氧化石墨烯与预处理文库吸附比例的测定 | 第40页 |
| 2.3.4 PCR 条件的优化 | 第40-42页 |
| 2.3.5 筛选文库富集度的考察 | 第42-43页 |
| 2.3.6 高通量测序结果的分析 | 第43-44页 |
| 2.4 小结 | 第44-45页 |
| 第3章 C 反应蛋白核酸适配体的序列优化及性质考察 | 第45-60页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 实验部分 | 第45-50页 |
| 3.2.1 试剂和仪器 | 第45-46页 |
| 3.2.2 测序结果的二级结构分析 | 第46-47页 |
| 3.2.3 筛选序列亲和力的测定 | 第47页 |
| 3.2.4 核酸适配体序列的优化 | 第47-48页 |
| 3.2.5 固定化的核酸适配体对 C 反应蛋白结合能力的考察 | 第48-49页 |
| 3.2.6 筛选序列特异性的测定 | 第49页 |
| 3.2.7 C 反应蛋白核酸适配体与其抗体识别位点差异的初步考察 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第50-59页 |
| 3.3.1 二级结构的分析 | 第50-53页 |
| 3.3.2 序列亲和力的测量结果 | 第53-54页 |
| 3.3.3 序列优化的结果 | 第54-55页 |
| 3.3.4 固定化的核酸适配体对 C 反应蛋白结合能力的测定结果 | 第55-57页 |
| 3.3.5 序列特异性的测量结果 | 第57-58页 |
| 3.3.6 C 反应蛋白核酸适配体与其抗体识别位点差异的初步考察结果 | 第58-59页 |
| 3.4 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
