摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第1章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 植物内生菌的研究现状 | 第12-17页 |
1.1.1 内生菌的定义 | 第12页 |
1.1.2 内生菌的分布与多样性 | 第12-13页 |
1.1.3 植物内生菌与宿主的关系 | 第13-14页 |
1.1.4 内生菌生物活性以及活性代谢产物研究 | 第14-17页 |
1.2 腺苷脱氨酶简介 | 第17-18页 |
1.3 腺苷脱氨酶抑制剂的相关研究 | 第18-19页 |
1.4 本论文的研究意义 | 第19-20页 |
第2章 植物种子中内生菌的分离及ADA良性菌株的筛选 | 第20-34页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料 | 第20-22页 |
2.2.1 药用植物种子 | 第20页 |
2.2.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.2.3 主要仪器 | 第21-22页 |
2.2.4 培养基及溶剂的配制 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-25页 |
2.3.1 药材种子中内生菌的分离纯化 | 第22页 |
2.3.2 内生菌的保存 | 第22页 |
2.3.3 内生菌的发酵及样品制备 | 第22-23页 |
2.3.4 ADA抑制剂筛选平台 | 第23页 |
2.3.5 ADA抑制剂活性菌株的初筛与复筛 | 第23页 |
2.3.6 ADA抑制剂活性菌株的形态学观察及分子生物学鉴定 | 第23-25页 |
2.4 实验结果 | 第25-32页 |
2.4.1 ADA抑制剂筛选平台验证 | 第25-26页 |
2.4.2 内生菌发酵液提取物ADA活性初筛结果 | 第26-28页 |
2.4.3 高活性菌株复筛及分类鉴定 | 第28-32页 |
2.5 讨论 | 第32-33页 |
2.6 小结 | 第33-34页 |
第3章 植物内生菌的分离及ADA良性菌株的筛选 | 第34-42页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 实验材料 | 第34-36页 |
3.2.1 植物材料 | 第34页 |
3.2.2 主要试剂 | 第34-35页 |
3.2.3 主要仪器 | 第35-36页 |
3.3 实验方法 | 第36-37页 |
3.3.1 内生菌的分离 | 第36页 |
3.3.2 内生菌的保存 | 第36页 |
3.3.3 内生菌的发酵及样品制备 | 第36页 |
3.3.4 ADA抑制剂活性菌株的初筛 | 第36页 |
3.3.5 ADA抑制剂活性菌株的复筛 | 第36页 |
3.3.6 ADA抑制剂活性菌株的形态学观察及分子生物学鉴定 | 第36-37页 |
3.4 实验结果 | 第37-41页 |
3.4.1 内生菌的分离及活性菌株的初筛 | 第37-38页 |
3.4.2 高活性菌株的复筛结果 | 第38页 |
3.4.3 部分活性菌株的形态及分类鉴定 | 第38-39页 |
3.4.4 QJ-4菌株18srDNA序列分析 | 第39-41页 |
3.5 讨论 | 第41页 |
3.6 小结 | 第41-42页 |
第4章 活性化合物的追踪分离 | 第42-56页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 实验材料 | 第42-44页 |
4.2.1 实验菌株 | 第42页 |
4.2.2 主要试剂 | 第42-43页 |
4.2.3 主要仪器 | 第43-44页 |
4.2.4 试剂配制 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-48页 |
4.3.1 WT-9菌株活性成分的追踪分离 | 第44-46页 |
4.3.2 QJ-4菌株活性成分的追踪分离 | 第46-47页 |
4.3.3 化合物ADA抑制活性的IC50测定 | 第47-48页 |
4.3.4 化合物抑制类型的判定 | 第48页 |
4.4 实验结果 | 第48-54页 |
4.4.1 化合物结构鉴定 | 第48-53页 |
4.4.2 化合物ADA抑制活性IC50测定 | 第53页 |
4.4.3 化合物H3和化合物H9抑制类型的判定 | 第53-54页 |
4.5 讨论 | 第54-55页 |
4.6 小结 | 第55-56页 |
第5章 化合物抗肿瘤活性测定 | 第56-60页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 实验材料 | 第56-57页 |
5.2.1 细胞株 | 第56页 |
5.2.2 主要试剂 | 第56页 |
5.2.3 主要仪器 | 第56-57页 |
5.2.4 培养液与主要溶剂的配制 | 第57页 |
5.3 实验方法 | 第57-58页 |
5.3.1 MTT原理 | 第57页 |
5.3.2 化合物3对肿瘤细胞的抑制作用 | 第57页 |
5.3.3 化合物H9对肿瘤细胞的抑制作用 | 第57-58页 |
5.4 实验结果 | 第58-59页 |
5.4.1 化合物H3对肿瘤细胞的抑制作用 | 第58页 |
5.4.2 将化合物H9对肿瘤细胞的抑制作用 | 第58-59页 |
5.5 讨论 | 第59页 |
5.6 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录A (攻读硕士期间所发表的学术论文) | 第68页 |