摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文缩略语 | 第14-19页 |
论文序言 | 第19-21页 |
第一部分 :PbGPI16对伯氏疟原虫生活史的影响 | 第21-42页 |
1 前言 | 第21-24页 |
2 材料方法 | 第24-33页 |
2.1 仪器与试剂 | 第24-25页 |
2.1.1 数据库及应用软件 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-31页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第26页 |
2.2.2 基因重组虫株建立 | 第26-30页 |
2.2.3 PbGPI16表达阶段检测 | 第30-31页 |
2.2.4 基因敲除虫株△pbgpi16表型检测 | 第31页 |
2.3 统计学分析 | 第31-33页 |
3 结果 | 第33-39页 |
3.1 伯氏疟原虫 GPI-T 组成 | 第33-35页 |
3.2 成功建立基因敲除及HA标签打靶载体 | 第35-36页 |
3.3 成功获取pbgpi16-ha及△pbgpi16虫株 | 第36页 |
3.4 P.berghei发育各阶段中PbGPI均有表达表达 | 第36-37页 |
3.5 PbGPI16缺失疟原虫侵袭红细胞能力下降并影响蚊内阶段发育 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
5.结论 | 第41-42页 |
第二部分 :PbGPI16缺失对伯氏疟原虫中间宿主小鼠的影响 | 第42-70页 |
1 前言 | 第42-44页 |
2 材料及方法 | 第44-54页 |
2.1 仪器与试剂 | 第44-46页 |
2.1.1 数据库及应用软件 | 第44页 |
2.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
2.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
2.1.4 小鼠和疟原虫 | 第46页 |
2.2 实验方法 | 第46-53页 |
2.2.1 免疫印迹 | 第46页 |
2.2.2 免疫荧光分析 | 第46-47页 |
2.2.3 实验性感染和血脑屏障完整性 | 第47页 |
2.2.4 组织病理和免疫组化 | 第47-49页 |
2.2.5 RNA提取和实时定量PCR | 第49-51页 |
2.2.6 细胞因子的测量 | 第51-52页 |
2.2.7 流式细胞术 | 第52-53页 |
2.2.8 检测脑和脾中的NF-κB | 第53页 |
2.3 统计学分析 | 第53-54页 |
3 结果 | 第54-65页 |
3.1 PbGPI16缺陷影响GPI锚定蛋白锚定细胞膜过程 | 第54-55页 |
3.2 PbGPI16缺陷降低C57BL/6小鼠实验性脑疟发病率 | 第55-56页 |
3.3 Δpbgpi16感染小鼠实验性脑疟病理改变降低 | 第56-57页 |
3.4 Δpbgpi16感染小鼠的前炎反应下降 | 第57-58页 |
3.5 Δpbgpi16感染小鼠脾中的Th1细胞和脑中CD8~+T细胞数量较野生型PbA感染小鼠减少 | 第58-60页 |
3.6 PbGPI16缺陷疟原虫感染C57BL/6小鼠脾组织中树突状细胞的分化成熟显著延迟 | 第60-61页 |
3.7 Δpbgpi16感染小鼠调节性T细胞数量增加,产生TGF-β和IL-10抗炎症分子相对增多 | 第61-63页 |
3.8 Δpbgpi16感染小鼠体内的NF-κB通路未激活 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
第三部分 :PbGPI16缺失对伯氏疟原虫终宿主按蚊的影响 | 第70-82页 |
1 前言 | 第70-73页 |
2 材料方法 | 第73-77页 |
2.1 仪器与试剂 | 第73页 |
2.1.1 数据库及应用软件 | 第73页 |
2.1.2 主要试剂 | 第73页 |
2.1.3 主要仪器 | 第73页 |
2.2 实验方法 | 第73-76页 |
2.2.1 直接模饲实验 | 第73-74页 |
2.2.2 按蚊体内AsNOS及AsINR基因表达量检测 | 第74-76页 |
2.2.3 按蚊产卵量计数 | 第76页 |
2.3 统计学分析 | 第76-77页 |
3 结果 | 第77-79页 |
3.1 Δpbgpi16感染按蚊体内NOS表达未上升 | 第77页 |
3.2 Δpbgpi16感染按蚊产卵量未出现明显下降 | 第77-79页 |
4 讨论 | 第79-81页 |
5 结论 | 第81-82页 |
本研究创新性的自我评价 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-96页 |
综述 | 第96-117页 |
参考文献 | 第104-117页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
个人简介 | 第119页 |