| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第12页 |
| 1.2 酵母研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.1 酵母的分类 | 第13页 |
| 1.2.2 酿酒酵母表面展示系统及其优势 | 第13-14页 |
| 1.2.3 基于酿酒酵母表面展示系统构建的病毒疫苗研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.4 酿酒酵母作为口服疫苗递送载体的优势 | 第15页 |
| 1.3 ZIKV简介 | 第15-20页 |
| 1.3.1 ZIKV感染对人类健康的危害 | 第16-17页 |
| 1.3.2 ZIKV结构分析 | 第17页 |
| 1.3.3 ZIKV疫苗的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4 研究内容与技术路线 | 第20-23页 |
| 第2章 表面展示型酿酒酵母表达载体的构建及鉴定 | 第23-41页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验仪器、材料 | 第23-29页 |
| 2.2.1 仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.2 材料 | 第24-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.3.1 Envelope基因DNA浓度测定 | 第29页 |
| 2.3.2 Envelope基因的扩增和酶切分析 | 第29-31页 |
| 2.3.3 pYD1质粒的提取与酶切分析 | 第31-33页 |
| 2.3.4 质粒pYD1-Envelope的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.5 表面展示型酿酒酵母表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.4 结果 | 第36-39页 |
| 2.4.1 Envelope基因的PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| 2.4.2 质粒pYD1的酶切分析 | 第37-38页 |
| 2.4.3 质粒pYD1-Envelope的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 2.4.4 Envelope目标基因的PCR鉴定 | 第39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-41页 |
| 第3章 表面展示型酿酒酵母中Envelope蛋白的定位鉴定及定量分析 | 第41-55页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验仪器、材料 | 第41-44页 |
| 3.2.1 仪器 | 第41页 |
| 3.2.2 材料 | 第41-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 3.3.1 表面展示型酿酒酵母表达载体的诱导表达及生长曲线测定 | 第44页 |
| 3.3.2 表达产物的Westernblot分析 | 第44-47页 |
| 3.3.3 免疫荧光分析 | 第47页 |
| 3.3.4 流式细胞仪分析 | 第47-48页 |
| 3.3.5 蛋白浓度测定 | 第48-49页 |
| 3.4 结果 | 第49-54页 |
| 3.4.1 表面展示型酿酒酵母表达载体生长曲线 | 第49-50页 |
| 3.4.2 Westernblot分析 | 第50-51页 |
| 3.4.3 免疫荧光分析 | 第51-52页 |
| 3.4.4 流式细胞分析 | 第52-53页 |
| 3.4.5 蛋白浓度的测定 | 第53-54页 |
| 3.5 讨论 | 第54-55页 |
| 第4章 表面展示型酿酒酵母EBY100/pYD1-Envelope免疫活性分析 | 第55-68页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验仪器、材料 | 第55-57页 |
| 4.2.1 仪器 | 第55页 |
| 4.2.2 材料 | 第55-57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-61页 |
| 4.3.1 免疫前准备 | 第57-58页 |
| 4.3.2 Envelope特异性血清IgG的检测方法 | 第58-59页 |
| 4.3.3 Envelope特异性血清IgM的检测方法 | 第59页 |
| 4.3.4 Envelope特异性粪便IgA的检测方法 | 第59-61页 |
| 4.4 结果 | 第61-67页 |
| 4.4.1 不同免疫方案对血清IgG的影响 | 第61-63页 |
| 4.4.2 不同免疫方案对血清IgM的影响 | 第63-65页 |
| 4.4.3 不同免疫方案对粪便IgA的影响 | 第65-67页 |
| 4.5 讨论 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第76页 |
