摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第16-33页 |
1.1 逆境与非生物胁迫 | 第16-33页 |
1.2 非生物胁迫对植物的影响 | 第17-18页 |
1.2.1 渗透胁迫 | 第17-18页 |
1.2.2 离子胁迫 | 第18页 |
1.2.3 氧化胁迫 | 第18页 |
1.3 植物逆境胁迫的应答机制 | 第18-24页 |
1.3.1 植物对渗透胁迫的应答 | 第19页 |
1.3.2 植物对离子胁迫的应答 | 第19-20页 |
1.3.3 植物对氧化胁迫的应答 | 第20-21页 |
1.3.4 非生物胁迫应答的ABA信号通路 | 第21-23页 |
1.3.5 相关耐逆基因研究进展 | 第23-24页 |
1.4 甲硫氨酸亚砜还原酶(MSR) | 第24-27页 |
1.4.1 甲硫氨酸的氧化 | 第24-25页 |
1.4.2 MSRA与MSRB | 第25-26页 |
1.4.3 MSR的催化机制 | 第26-27页 |
1.5 MSR的研究进展 | 第27-29页 |
1.6 前期工作进展 | 第29-31页 |
1.7 本论文的目的、主要研究内容和意义 | 第31-33页 |
第二章 TaMSRA4.1基本特征与酶学性质鉴定 | 第33-51页 |
2.1 实验材料 | 第33页 |
2.2 实验方法 | 第33-40页 |
2.2.1 小麦材料培养 | 第33-34页 |
2.2.2 小麦RNA提取及cDNA的合成 | 第34-35页 |
2.2.3 扬麦20中TaMSRA4.1基因的克隆 | 第35-36页 |
2.2.4 TaMSRA4.1基因分子结构特征分析 | 第36-37页 |
2.2.5 TaMSRA4.1原核表达和纯化 | 第37-39页 |
2.2.6 TaMSRA4.1酶学性质鉴定 | 第39-40页 |
2.2.7 TaMSRA4.1诱导表达模式分析 | 第40页 |
2.3 结果与分析 | 第40-49页 |
2.3.1 TaMSRA4.1与TaMSRA4.2 | 第40-42页 |
2.3.2 TaMSRA4.1基因分子结构特征分析 | 第42-45页 |
2.3.3 TaMSRA4.1原核表达和纯化 | 第45-46页 |
2.3.4 TaMSRA4.1酶学性质鉴定 | 第46-47页 |
2.3.5 TaMSRA4.1诱导表达模式分析 | 第47-49页 |
2.4 讨论 | 第49-51页 |
第三章 TaMSRA4.1基因功能研究 | 第51-84页 |
3.1 实验材料 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-59页 |
3.2.1 植物材料的培养与处理 | 第51页 |
3.2.2 小麦转基因株系的构建 | 第51-52页 |
3.2.3 相关生理指标测定 | 第52-54页 |
3.2.4 ROS染色检测及相关酶活测定 | 第54-55页 |
3.2.5 ROS相关酶活测定 | 第55-56页 |
3.2.6 小麦及拟南芥材料MSR酶活测定 | 第56页 |
3.2.7 PCR方法鉴定拟南芥突变体纯系株系 | 第56-57页 |
3.2.8 气孔运动 | 第57-58页 |
3.2.9 ABA含量测定 | 第58页 |
3.2.10 小麦表型实验 | 第58-59页 |
3.2.11 拟南芥表型实验 | 第59页 |
3.3 结果与分析 | 第59-81页 |
3.3.1 小麦过表达系和拟南芥过表达系鉴定 | 第59-62页 |
3.3.2 TaMSRA4.1增强小麦对盐旱胁迫的抗性 | 第62-64页 |
3.3.3 TaMSRA4.1降低小麦在盐旱胁迫下ROS的积累 | 第64-66页 |
3.3.4 TaMSRA4.1增强拟南芥对盐旱胁迫的抗性 | 第66-68页 |
3.3.5 TaMSRA4.1降低拟南芥在盐旱胁迫下ROS的积累 | 第68-74页 |
3.3.6 TaMSRA4.1提高气孔对ABA敏感性并作用于ABA通路 | 第74-81页 |
3.4 讨论 | 第81-84页 |
第四章 TaMSRA4.1对盐旱胁迫应答机制研究 | 第84-119页 |
4.1 实验材料 | 第84页 |
4.2 实验方法 | 第84-91页 |
4.2.1 主要试剂及配方 | 第84-85页 |
4.2.2 TaMSRA4.1底物生物信息学分析 | 第85页 |
4.2.3 TaHO1亚细胞定位 | 第85-87页 |
4.2.4 TaHO1结构域及三级结构分析 | 第87页 |
4.2.5 酵母双杂交 | 第87-88页 |
4.2.6 BiFC | 第88-89页 |
4.2.7 Co-IP | 第89-90页 |
4.2.8 TaHO1蛋白原核表达及纯化 | 第90页 |
4.2.9 HO酶活检测 | 第90-91页 |
4.2.10 TaMSRA4.1体外底物反应实验 | 第91页 |
4.2.11 遗传实验 | 第91页 |
4.3 结果与分析 | 第91-116页 |
4.3.1 TaMSRA4.1互作蛋白生物信息学分析 | 第91-94页 |
4.3.2 TaHO1的亚细胞定位 | 第94页 |
4.3.3 TaHO1结构域及三级结构分析 | 第94-96页 |
4.3.4 TaMSRA4.1与TaHO1互作 | 第96-99页 |
4.3.5 TaHO1是TaMSRA4.1的底物 | 第99-101页 |
4.3.6 Met84及Met92对于维持TaHO1蛋白稳定具有重要作用 | 第101-102页 |
4.3.7 TaMSRA4.1与TaHO1互作药理学表型验证 | 第102-106页 |
4.3.8 TaMSRA4.1与TaHO1互作遗传实验验证 | 第106-108页 |
4.3.9 TaMSRA4.1是通过与TaHO1互作调控ROS平衡 | 第108-111页 |
4.3.10 TaMSRA4.1是通过与TaHO1互作调控ABA通路 | 第111-113页 |
4.3.11 CO参与TaMSRA4.1盐旱胁迫响应过程 | 第113-116页 |
4.4 讨论 | 第116-119页 |
总结 | 第119-121页 |
参考文献 | 第121-129页 |
附表 | 第129-135页 |
作者简介 | 第135-136页 |
致谢 | 第136-138页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第138页 |