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小麦甲硫氨酸亚砜还原酶基因TaMSRA4.1逆境应答机制

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第16-33页
    1.1 逆境与非生物胁迫第16-33页
        1.2 非生物胁迫对植物的影响第17-18页
            1.2.1 渗透胁迫第17-18页
            1.2.2 离子胁迫第18页
            1.2.3 氧化胁迫第18页
        1.3 植物逆境胁迫的应答机制第18-24页
            1.3.1 植物对渗透胁迫的应答第19页
            1.3.2 植物对离子胁迫的应答第19-20页
            1.3.3 植物对氧化胁迫的应答第20-21页
            1.3.4 非生物胁迫应答的ABA信号通路第21-23页
            1.3.5 相关耐逆基因研究进展第23-24页
        1.4 甲硫氨酸亚砜还原酶(MSR)第24-27页
            1.4.1 甲硫氨酸的氧化第24-25页
            1.4.2 MSRA与MSRB第25-26页
            1.4.3 MSR的催化机制第26-27页
        1.5 MSR的研究进展第27-29页
        1.6 前期工作进展第29-31页
        1.7 本论文的目的、主要研究内容和意义第31-33页
第二章 TaMSRA4.1基本特征与酶学性质鉴定第33-51页
    2.1 实验材料第33页
    2.2 实验方法第33-40页
        2.2.1 小麦材料培养第33-34页
        2.2.2 小麦RNA提取及cDNA的合成第34-35页
        2.2.3 扬麦20中TaMSRA4.1基因的克隆第35-36页
        2.2.4 TaMSRA4.1基因分子结构特征分析第36-37页
        2.2.5 TaMSRA4.1原核表达和纯化第37-39页
        2.2.6 TaMSRA4.1酶学性质鉴定第39-40页
        2.2.7 TaMSRA4.1诱导表达模式分析第40页
    2.3 结果与分析第40-49页
        2.3.1 TaMSRA4.1与TaMSRA4.2第40-42页
        2.3.2 TaMSRA4.1基因分子结构特征分析第42-45页
        2.3.3 TaMSRA4.1原核表达和纯化第45-46页
        2.3.4 TaMSRA4.1酶学性质鉴定第46-47页
        2.3.5 TaMSRA4.1诱导表达模式分析第47-49页
    2.4 讨论第49-51页
第三章 TaMSRA4.1基因功能研究第51-84页
    3.1 实验材料第51页
    3.2 实验方法第51-59页
        3.2.1 植物材料的培养与处理第51页
        3.2.2 小麦转基因株系的构建第51-52页
        3.2.3 相关生理指标测定第52-54页
        3.2.4 ROS染色检测及相关酶活测定第54-55页
        3.2.5 ROS相关酶活测定第55-56页
        3.2.6 小麦及拟南芥材料MSR酶活测定第56页
        3.2.7 PCR方法鉴定拟南芥突变体纯系株系第56-57页
        3.2.8 气孔运动第57-58页
        3.2.9 ABA含量测定第58页
        3.2.10 小麦表型实验第58-59页
        3.2.11 拟南芥表型实验第59页
    3.3 结果与分析第59-81页
        3.3.1 小麦过表达系和拟南芥过表达系鉴定第59-62页
        3.3.2 TaMSRA4.1增强小麦对盐旱胁迫的抗性第62-64页
        3.3.3 TaMSRA4.1降低小麦在盐旱胁迫下ROS的积累第64-66页
        3.3.4 TaMSRA4.1增强拟南芥对盐旱胁迫的抗性第66-68页
        3.3.5 TaMSRA4.1降低拟南芥在盐旱胁迫下ROS的积累第68-74页
        3.3.6 TaMSRA4.1提高气孔对ABA敏感性并作用于ABA通路第74-81页
    3.4 讨论第81-84页
第四章 TaMSRA4.1对盐旱胁迫应答机制研究第84-119页
    4.1 实验材料第84页
    4.2 实验方法第84-91页
        4.2.1 主要试剂及配方第84-85页
        4.2.2 TaMSRA4.1底物生物信息学分析第85页
        4.2.3 TaHO1亚细胞定位第85-87页
        4.2.4 TaHO1结构域及三级结构分析第87页
        4.2.5 酵母双杂交第87-88页
        4.2.6 BiFC第88-89页
        4.2.7 Co-IP第89-90页
        4.2.8 TaHO1蛋白原核表达及纯化第90页
        4.2.9 HO酶活检测第90-91页
        4.2.10 TaMSRA4.1体外底物反应实验第91页
        4.2.11 遗传实验第91页
    4.3 结果与分析第91-116页
        4.3.1 TaMSRA4.1互作蛋白生物信息学分析第91-94页
        4.3.2 TaHO1的亚细胞定位第94页
        4.3.3 TaHO1结构域及三级结构分析第94-96页
        4.3.4 TaMSRA4.1与TaHO1互作第96-99页
        4.3.5 TaHO1是TaMSRA4.1的底物第99-101页
        4.3.6 Met84及Met92对于维持TaHO1蛋白稳定具有重要作用第101-102页
        4.3.7 TaMSRA4.1与TaHO1互作药理学表型验证第102-106页
        4.3.8 TaMSRA4.1与TaHO1互作遗传实验验证第106-108页
        4.3.9 TaMSRA4.1是通过与TaHO1互作调控ROS平衡第108-111页
        4.3.10 TaMSRA4.1是通过与TaHO1互作调控ABA通路第111-113页
        4.3.11 CO参与TaMSRA4.1盐旱胁迫响应过程第113-116页
    4.4 讨论第116-119页
总结第119-121页
参考文献第121-129页
附表第129-135页
作者简介第135-136页
致谢第136-138页
学位论文评阅及答辩情况表第138页

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