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拟南芥BAG蛋白的GFP定位和超表达分析

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
缩写表第6-10页
第一章 文献综述第10-22页
    1. BAG家族蛋白第10-17页
        1.1 BAG结构域第10-11页
        1.2 BAG蛋白的功能第11-17页
    2. 热休克蛋白家族第17-22页
        2.1 HSP70家族的基因结构及特点第17-19页
        2.2 HSP70的生物学功能第19-22页
第二章 拟南芥BAG-4与BAG-7蛋白的细胞定位第22-35页
    1. 前言第22页
    2. 材料与方法第22-31页
        2.1 质粒和菌株第22页
        2.2 引物设计第22页
        2.3 化学试剂及抗生素第22-23页
        2.4 限制性内切酶以及其他工具酶第23页
        2.5 基本培养基第23-24页
        2.6 常用缓冲液第24页
        2.7 细菌的培养及菌种保存第24-25页
        2.8 质粒DNA的制备第25页
        2.9 PCR扩增获得目的片段第25-26页
        2.10 PCR产物的纯化回收第26页
        2.11 限制性酶切第26页
        2.12 去磷酸化第26-27页
        2.13 平端化第27页
        2.14 DNA片段的连接第27页
        2.15 大肠杆菌感受态细胞的制备第27页
        2.16 连接产物转化大肠杆菌DH5α第27-28页
        2.17 质粒的酶切和测序鉴定第28页
        2.18 Gateway克隆第28-29页
        2.19 Gateway克隆的鉴定第29页
        2.20 冻融法农杆菌感受态细胞的制备第29页
        2.21 农杆菌的转化第29页
        2.22 拟南芥的栽培第29-30页
        2.23 浸花法转化拟南芥第30页
        2.24 亚细胞定位的转基因阳性苗筛选第30-31页
        2.25 纯合体植株的分离第31页
        2.26 DAPI染色第31页
        2.27 荧光观测第31页
    3. 结果与分析第31-35页
        3.1 载体构建第31-32页
        3.2 荧光观测第32-35页
第三章 拟南芥BAG基因的超表达分析第35-41页
    1. 前言第35页
    2. 实验材料与方法第35-37页
        2.1 质粒和菌株第35页
        2.2 引物设计第35页
        2.3 材料的种植及转化第35页
        2.4 超表达转基因阳性苗的筛选第35-36页
        2.5 超表达植株纯合体的分离第36页
        2.6 拟南芥DNA的提取第36页
        2.7 超表达植株的PCR检测第36页
        2.8 盐胁迫对功能缺失突变体atbag4、hsp70、atbag7及双突变体atbag4/hsp70萌发率的影响第36-37页
        2.9 盐胁迫下拟南芥突变体atbag4、hsp70、atbag7及双突变体atbag4/hsp70植株的表型分析第37页
        2.10 盐胁迫下拟南芥超表达植株的表型分析第37页
    3. 结果及分析第37-41页
        3.1 超表达植株的PCR鉴定第37-38页
        3.2 盐胁迫对拟南芥突变体种子萌发的影响第38-39页
        3.3 突变体对盐胁迫的表型分析第39页
        3.4 超表达植株对盐胁迫的表型分析第39-41页
第四章 拟南芥BAG蛋白基因的诱导表达模式分析第41-49页
    1. 前言第41页
    2. 实验材料与方法第41-44页
        2.1 质粒和菌株第41页
        2.2 GUS染色液及脱色液的组成第41页
        2.3 材料的种植、转化、转基因阳性苗的筛选及纯合体植株的分离第41页
        2.4 逆境胁迫处理方法第41-42页
        2.5 GUS基因的瞬时表达检测第42页
        2.6 引物设计第42页
        2.7 PCR扩增第42-43页
        2.8 PCR回收及纯化第43页
        2.9 限制性酶切第43页
        2.10 Gateway克隆第43-44页
    3. 实验结果第44-49页
        3.1 载体的构建第44-46页
        3.2 AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达受盐胁迫诱导第46-47页
        3.3 紫外UVB胁迫诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达第47页
        3.4 干旱诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达第47-48页
        3.5 低温诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达第48-49页
第五章 讨论第49-51页
参考文献第51-60页
致谢第60页

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