| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩写表 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1. BAG家族蛋白 | 第10-17页 |
| 1.1 BAG结构域 | 第10-11页 |
| 1.2 BAG蛋白的功能 | 第11-17页 |
| 2. 热休克蛋白家族 | 第17-22页 |
| 2.1 HSP70家族的基因结构及特点 | 第17-19页 |
| 2.2 HSP70的生物学功能 | 第19-22页 |
| 第二章 拟南芥BAG-4与BAG-7蛋白的细胞定位 | 第22-35页 |
| 1. 前言 | 第22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 质粒和菌株 | 第22页 |
| 2.2 引物设计 | 第22页 |
| 2.3 化学试剂及抗生素 | 第22-23页 |
| 2.4 限制性内切酶以及其他工具酶 | 第23页 |
| 2.5 基本培养基 | 第23-24页 |
| 2.6 常用缓冲液 | 第24页 |
| 2.7 细菌的培养及菌种保存 | 第24-25页 |
| 2.8 质粒DNA的制备 | 第25页 |
| 2.9 PCR扩增获得目的片段 | 第25-26页 |
| 2.10 PCR产物的纯化回收 | 第26页 |
| 2.11 限制性酶切 | 第26页 |
| 2.12 去磷酸化 | 第26-27页 |
| 2.13 平端化 | 第27页 |
| 2.14 DNA片段的连接 | 第27页 |
| 2.15 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| 2.16 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第27-28页 |
| 2.17 质粒的酶切和测序鉴定 | 第28页 |
| 2.18 Gateway克隆 | 第28-29页 |
| 2.19 Gateway克隆的鉴定 | 第29页 |
| 2.20 冻融法农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.21 农杆菌的转化 | 第29页 |
| 2.22 拟南芥的栽培 | 第29-30页 |
| 2.23 浸花法转化拟南芥 | 第30页 |
| 2.24 亚细胞定位的转基因阳性苗筛选 | 第30-31页 |
| 2.25 纯合体植株的分离 | 第31页 |
| 2.26 DAPI染色 | 第31页 |
| 2.27 荧光观测 | 第31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.1 载体构建 | 第31-32页 |
| 3.2 荧光观测 | 第32-35页 |
| 第三章 拟南芥BAG基因的超表达分析 | 第35-41页 |
| 1. 前言 | 第35页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.1 质粒和菌株 | 第35页 |
| 2.2 引物设计 | 第35页 |
| 2.3 材料的种植及转化 | 第35页 |
| 2.4 超表达转基因阳性苗的筛选 | 第35-36页 |
| 2.5 超表达植株纯合体的分离 | 第36页 |
| 2.6 拟南芥DNA的提取 | 第36页 |
| 2.7 超表达植株的PCR检测 | 第36页 |
| 2.8 盐胁迫对功能缺失突变体atbag4、hsp70、atbag7及双突变体atbag4/hsp70萌发率的影响 | 第36-37页 |
| 2.9 盐胁迫下拟南芥突变体atbag4、hsp70、atbag7及双突变体atbag4/hsp70植株的表型分析 | 第37页 |
| 2.10 盐胁迫下拟南芥超表达植株的表型分析 | 第37页 |
| 3. 结果及分析 | 第37-41页 |
| 3.1 超表达植株的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2 盐胁迫对拟南芥突变体种子萌发的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 突变体对盐胁迫的表型分析 | 第39页 |
| 3.4 超表达植株对盐胁迫的表型分析 | 第39-41页 |
| 第四章 拟南芥BAG蛋白基因的诱导表达模式分析 | 第41-49页 |
| 1. 前言 | 第41页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第41-44页 |
| 2.1 质粒和菌株 | 第41页 |
| 2.2 GUS染色液及脱色液的组成 | 第41页 |
| 2.3 材料的种植、转化、转基因阳性苗的筛选及纯合体植株的分离 | 第41页 |
| 2.4 逆境胁迫处理方法 | 第41-42页 |
| 2.5 GUS基因的瞬时表达检测 | 第42页 |
| 2.6 引物设计 | 第42页 |
| 2.7 PCR扩增 | 第42-43页 |
| 2.8 PCR回收及纯化 | 第43页 |
| 2.9 限制性酶切 | 第43页 |
| 2.10 Gateway克隆 | 第43-44页 |
| 3. 实验结果 | 第44-49页 |
| 3.1 载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.2 AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达受盐胁迫诱导 | 第46-47页 |
| 3.3 紫外UVB胁迫诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达 | 第47页 |
| 3.4 干旱诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达 | 第47-48页 |
| 3.5 低温诱导AtHSP70、AtBAG-4、AtBAG-7的表达 | 第48-49页 |
| 第五章 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
