摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
1. 文献综述 | 第12-21页 |
前言 | 第12-13页 |
1.1 结核分枝杆菌与免疫 | 第13-15页 |
1.1.1 结核分枝杆菌及其宿主细胞 | 第13-14页 |
1.1.2 结核分枝杆菌与免疫逃避 | 第14页 |
1.1.3 结核分枝杆菌与卡介苗 | 第14-15页 |
1.2 树突状细胞在结核免疫中的作用 | 第15-16页 |
1.2.1 树突状细胞的生物学特性 | 第15页 |
1.2.2 树突状细胞与结核分枝杆菌的相互作用 | 第15-16页 |
1.3 TLR/NF-κB信号通路 | 第16-21页 |
1.3.1 Toll样受体 | 第16-18页 |
1.3.2 NF-κB信号通路 | 第18-19页 |
1.3.3 Toll样受体/NF-κB信号通路与细胞因子及趋化因子的分泌 | 第19-21页 |
2. 研究目的与意义 | 第21-22页 |
3. 材料与方法 | 第22-27页 |
3.1 实验材料 | 第22-23页 |
3.1.1 实验所用菌株及实验动物 | 第22页 |
3.1.2 细菌及细胞培养基 | 第22页 |
3.1.3 荧光定量PCR相关引物 | 第22-23页 |
3.1.4 主要试剂 | 第23页 |
3.2 牛分枝杆菌与卡介苗的培养计数 | 第23页 |
3.3 树突状细胞的培养与鉴定 | 第23-24页 |
3.3.1 树突状细胞的培养 | 第23-24页 |
3.3.2 树突状细胞的鉴定 | 第24页 |
3.4 树突状细胞的细菌感染实验 | 第24页 |
3.5 树突状细胞感染后,细胞因子及趋化因子的检测 | 第24-25页 |
3.6 调节DCs分泌细胞因子及趋化因子的信号通路的检测 | 第25-27页 |
3.6.1 Real time PCR检测TLR/NF-κB信号通路相关基因的转录水平 | 第25-27页 |
3.6.1.1 树突状细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
3.6.1.2 将提取的RNA反转录为cDNA | 第26页 |
3.6.1.3 荧光定量PCR检测 | 第26-27页 |
3.6.2 Western blot对NF-κB通路关键蛋白表达水平的检测 | 第27页 |
3.6.3 TLR/NF-κB通路的阻断实验 | 第27页 |
3.6.3.1 中和抗体阻断TLR2和TLR4 | 第27页 |
3.6.3.2 PDTC阻断NF-κB的核转位 | 第27页 |
4. 结果 | 第27-39页 |
4.1 树突状细胞的纯度与成熟状态的鉴定 | 第27-28页 |
4.2 感染后树突状细胞分泌细胞因子及趋化因子的情况 | 第28-32页 |
4.3 荧光定量PCR检测TLR/NF-κB信号通路相关基因的转录水平情况 | 第32-35页 |
4.4 Western Blot检测NF-κB通路蛋白 | 第35-36页 |
4.5 阻断TLR/NF-κB信号通路后,对树突状细胞分泌细胞因子及趋化因子的影响情况 | 第36-39页 |
5. 讨论 | 第39-43页 |
5.1 牛分枝杆菌诱导DCs分泌细胞因子及趋化因子的差异与结核病致病机理之间的关系 | 第39-41页 |
5.2 调节DCs分泌细胞因子及趋化因子的信号通路的初步探讨 | 第41-43页 |
6. 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-52页 |
致谢 | 第52页 |