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miR-1介导Notch信号通路调控大鼠MSCs向心肌样细胞分化的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-30页
    2.1 实验材料第13-15页
        2.1.1 实验动物第13页
        2.1.2 主要试剂第13-15页
        2.1.3 主要仪器第15页
    2.2 实验方法第15-29页
        2.2.1 器材的灭菌、去 RNA 酶处理第15页
        2.2.2 相关液体的配制第15-19页
        2.2.3 大鼠 MSCs 分离、扩增培养及鉴定第19-20页
        2.2.4 大鼠 miR-1 慢病毒过表达载体构建和鉴定第20-22页
        2.2.5 重组慢病毒载体转染大鼠 MSCs 效率检测第22-24页
        2.2.6 qRT-PCR 检测心肌相关基因和 Notch 信号通路基因的表达第24-26页
        2.2.7 免疫细胞化学染色检测 cTnI 和 Cx43 的表达第26页
        2.2.8 Western blotting 检测 α-actin 的表达第26-29页
    2.3 统计学处理第29-30页
第3章 结果第30-51页
    3.1 大鼠 MSCs 生长特点第30页
    3.2 大鼠 MSCs 鉴定结果第30-31页
    3.3 miR-1 慢病毒过表达载体构建第31-37页
        3.3.1 线性化载体构建第31-32页
        3.3.2 慢病毒过表达载体鉴定第32页
        3.3.3 miR-1 慢病毒过表达载体包装与滴度检测第32-33页
        3.3.4 miR-1 慢病毒过表达载体感染大鼠 MSCs 效果第33-36页
        3.3.5 qRT-PCR 检测 miR-1 的表达结果第36-37页
    3.4 过表达 miR-1 的慢病毒转染 MSCs 结果第37-39页
        3.4.1 MSCs 的 miR-1 表达变化第38-39页
    3.5 心肌相关基因的 mRNA 表达变化第39-41页
    3.6 免疫荧光观察 cTnI 和 Cx43 的表达第41-43页
    3.7 Western blotting 检测 α-actin 的表达第43-44页
    3.8 Notch 信号通路基因的 mRNA 表达水平变化第44-51页
第4章 讨论第51-58页
第5章 结论及展望第58-59页
    5.1 结论第58页
    5.2 展望第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-65页
攻读学位期间的研究成果第65-66页
综述第66-74页
    参考文献第72-74页

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