摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-30页 |
2.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-15页 |
2.1.3 主要仪器 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-29页 |
2.2.1 器材的灭菌、去 RNA 酶处理 | 第15页 |
2.2.2 相关液体的配制 | 第15-19页 |
2.2.3 大鼠 MSCs 分离、扩增培养及鉴定 | 第19-20页 |
2.2.4 大鼠 miR-1 慢病毒过表达载体构建和鉴定 | 第20-22页 |
2.2.5 重组慢病毒载体转染大鼠 MSCs 效率检测 | 第22-24页 |
2.2.6 qRT-PCR 检测心肌相关基因和 Notch 信号通路基因的表达 | 第24-26页 |
2.2.7 免疫细胞化学染色检测 cTnI 和 Cx43 的表达 | 第26页 |
2.2.8 Western blotting 检测 α-actin 的表达 | 第26-29页 |
2.3 统计学处理 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-51页 |
3.1 大鼠 MSCs 生长特点 | 第30页 |
3.2 大鼠 MSCs 鉴定结果 | 第30-31页 |
3.3 miR-1 慢病毒过表达载体构建 | 第31-37页 |
3.3.1 线性化载体构建 | 第31-32页 |
3.3.2 慢病毒过表达载体鉴定 | 第32页 |
3.3.3 miR-1 慢病毒过表达载体包装与滴度检测 | 第32-33页 |
3.3.4 miR-1 慢病毒过表达载体感染大鼠 MSCs 效果 | 第33-36页 |
3.3.5 qRT-PCR 检测 miR-1 的表达结果 | 第36-37页 |
3.4 过表达 miR-1 的慢病毒转染 MSCs 结果 | 第37-39页 |
3.4.1 MSCs 的 miR-1 表达变化 | 第38-39页 |
3.5 心肌相关基因的 mRNA 表达变化 | 第39-41页 |
3.6 免疫荧光观察 cTnI 和 Cx43 的表达 | 第41-43页 |
3.7 Western blotting 检测 α-actin 的表达 | 第43-44页 |
3.8 Notch 信号通路基因的 mRNA 表达水平变化 | 第44-51页 |
第4章 讨论 | 第51-58页 |
第5章 结论及展望 | 第58-59页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 展望 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第65-66页 |
综述 | 第66-74页 |
参考文献 | 第72-74页 |