| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第11-35页 |
| 1.1 海洋石油污染 | 第11-19页 |
| 1.1.1 石油 | 第11页 |
| 1.1.2 石油成分 | 第11-12页 |
| 1.1.3 海洋石油污染现状 | 第12-13页 |
| 1.1.4 海洋石油污染危害 | 第13-15页 |
| 1.1.5 石油入海后的行为及归宿 | 第15-17页 |
| 1.1.6 海洋石油污染的生物修复 | 第17-19页 |
| 1.2 微生物多样性及其功能基因的研究方法 | 第19-22页 |
| 1.2.1 微生物多样性研究的传统方法和现代方法 | 第19-20页 |
| 1.2.2 分子生物学技术在海洋微生物功能基因研究中的应用 | 第20-22页 |
| 1.3 海洋石油烃微生物降解途径及其种群多样性 | 第22-29页 |
| 1.3.1 石油烃类化合物的微生物代谢途径 | 第22-27页 |
| 1.3.2 海洋石油烃降解微生物的研究进展 | 第27-29页 |
| 1.4 烷烃降解酶 | 第29-32页 |
| 1.4.1 烷烃降解酶系统的多样性 | 第29-30页 |
| 1.4.2 烷烃降解酶的研究进展 | 第30-32页 |
| 1.5 本论文的研究目的与意义 | 第32-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-52页 |
| 2.1 材料 | 第35-42页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第35页 |
| 2.1.2 试剂和药品 | 第35页 |
| 2.1.3 分子生物学用酶 | 第35页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.5 培养基和溶液 | 第36-39页 |
| 2.1.6 引物 | 第39-42页 |
| 2.1.7 分析软件 | 第42页 |
| 2.2 海洋石油菌的筛选 | 第42-43页 |
| 2.3 海洋石油降解菌石油降解率的粗筛 | 第43-45页 |
| 2.3.1 石油降解菌的培养方法 | 第43页 |
| 2.3.2 石油降解率的测定 | 第43-45页 |
| 2.4 石油降解菌的鉴定和系统发育树的构建 | 第45-47页 |
| 2.4.1 细菌 DNA 的提取 | 第45-46页 |
| 2.4.2 石油降解菌 16S rDNA 鉴定及其系统发育树的构建 | 第46-47页 |
| 2.5 细菌质粒的提取 | 第47-48页 |
| 2.6 石油降解菌石油烃降解酶基因的扩增和分析 | 第48-51页 |
| 2.7 高城郡海杆菌 WSL01 和耐盐芽孢杆菌 WH072 功能基因的扩增与分析 | 第51-52页 |
| 2.8 高城郡海杆菌 WSL01 p450 基因的异源表达 | 第52页 |
| 3 实验结果 | 第52-81页 |
| 3.1 渤海溢油区沉积物石油降解菌的分离 | 第52-55页 |
| 3.2 渤海溢油区沉积物分离菌的鉴定和多样性分析 | 第55-62页 |
| 3.2.1 渤海溢油区沉积物分离菌株石油降解率的粗筛 | 第55-59页 |
| 3.2.2 高效石油降解菌的系统进化分析 | 第59-61页 |
| 3.2.3 石油降解菌的多样性分析 | 第61-62页 |
| 3.3 石油降解菌质粒的提取 | 第62-63页 |
| 3.4 石油降解菌石油烃降解酶基因的扩增与分析 | 第63-69页 |
| 3.4.1 烷烃羟化酶基因 alkB | 第63-65页 |
| 3.4.2 细胞色素 p450 基因 | 第65-67页 |
| 3.4.3 黄素结合蛋白基因 almA | 第67-69页 |
| 3.5 高城郡海杆菌 WSL01 和耐盐芽孢杆菌 WH072 功能基因的扩增与分析 | 第69-79页 |
| 3.6 高城郡海杆菌 WSL01 p450 基因的异源表达 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 附录 | 第95-96页 |
