| Abstract | 第5-6页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-13页 |
| 2 材料和方法 | 第13-28页 |
| 2.1 标本来源 | 第13页 |
| 2.2 实验材料 | 第13-15页 |
| 2.2.1 实验试剂与试剂盒 | 第13-14页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第14页 |
| 2.2.3 引物设计与合成 | 第14-15页 |
| 2.3 实验方法 | 第15-28页 |
| 2.3.1 pGEM-T/GPC3 R-Long表达载体的构建及鉴定 | 第15-20页 |
| 2.3.2 pGEM-T/GPC3R ORF表达载体的构建及鉴定 | 第20-22页 |
| 2.3.3 截短型pGEM-T/GPC3N_(48)和pGEM-T/GPC3C_(550)表达载体的构建及鉴定 | 第22-25页 |
| 2.3.4 pcDNA3.1(+)/GPC3N_(48)-EGFP-GPC3C_(550)的嵌合 | 第25-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-33页 |
| 3.1 pGEM-T/GPC3 R-Long表达载体 | 第28-30页 |
| 3.1.1 总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.1.2 RT-PCR结果 | 第28页 |
| 3.1.3 蓝白斑筛选结果 | 第28-29页 |
| 3.1.4 菌液PCR验证 | 第29页 |
| 3.1.5 测序分析 | 第29-30页 |
| 3.2 pGEM-T/GPC3 ORF表达载体 | 第30-31页 |
| 3.2.1 PCR结果 | 第30页 |
| 3.2.2 菌液PCR验证 | 第30-31页 |
| 3.2.3 测序分析 | 第31页 |
| 3.3 截短型pGEM-T/GPC3N_(48)和pGEM-T/GPC3C_(550)表达载体 | 第31-32页 |
| 3.3.1 PCR结果 | 第31-32页 |
| 3.4 真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPC3N_(48)-EGFP-GPC3C_(550)的嵌合 | 第32-33页 |
| 3.4.1 pcDNA3.1(+)/GPC3C_(550)载体的构建和酶切鉴定 | 第32页 |
| 3.4.2 pcDNA3.1(+)/GPC3 N_(48)-EGFP-GPC3C_(550)的鉴定 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 本课题创新性研究以及不足 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 综述 | 第40-49页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
