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水稻类病斑突变体lm-ZH基因的图位克隆与功能分析

摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-27页
    1.1 植物先天免疫系统第13-17页
        1.1.1 PTI第13-15页
            1.1.1.1 细菌鞭毛蛋白激发植物免疫反应第13-14页
            1.1.1.2 真菌几丁质激发植物免疫反应第14-15页
        1.1.2 ETI第15-17页
    1.2 类病斑突变体研究进展第17-24页
        1.2.1 影响类病斑发生的途径第17-18页
        1.2.2 类病斑基因参与免疫应激反应的信号通路第18-20页
            1.2.2.1 ROS信号通路第18-19页
            1.2.2.2 茉莉酸和乙烯信号通路第19页
            1.2.2.3 一氧化氮(NO)信号途径第19-20页
            1.2.2.4 水杨酸信号途径第20页
        1.2.3 水稻类病斑突变体基因的克隆第20-24页
    1.3 泛素-蛋白酶体系统第24-27页
        1.3.1 泛素-蛋白酶体系统介导靶蛋白降解过程第24-25页
        1.3.2 CULLIN3生理功能研究进展第25-27页
第二章 lm-ZH表型鉴定及基因克隆第27-45页
    2.1 材料与方法第27-35页
        2.1.1 实验材料第27页
        2.1.2 实验方法第27-35页
            2.1.2.1 水稻种植与管理第27页
            2.1.2.2 遗传分析第27-28页
            2.1.2.3 DAB染色第28页
            2.1.2.4 ROS含量测定第28页
            2.1.2.5 稻瘟菌接种第28-29页
            2.1.2.6 白叶枯菌接种第29页
            2.1.2.7 DNA提取第29-30页
            2.1.2.8 RNA提取第30页
            2.1.2.9 第一链cDNA合成第30页
            2.1.2.10 定量PCR第30-31页
            2.1.2.11 PCR反应第31页
            2.1.2.12 变性聚丙烯酰氨凝胶电泳第31页
            2.1.2.13 银染第31-32页
            2.1.2.14 基因定位第32页
            2.1.2.15 候选基因分析第32-33页
            2.1.2.16 互补载体构建第33-34页
            2.1.2.17 水稻遗传转化第34-35页
    2.2 结果及分析第35-43页
        2.2.1 lm-ZH类病斑表型鉴定第35-37页
        2.2.2 PAMP诱导ROS积累动态分析第37页
        2.2.3 稻瘟病抗性鉴定第37页
        2.2.4 白叶枯病抗性鉴定第37-39页
        2.2.5 防卫相关基因表达量检测第39页
        2.2.6 lm-ZH的遗传分析第39-40页
        2.2.7 lm-ZH的基因定位第40页
        2.2.8 候选基因分析第40页
        2.2.9 lm-ZH的基因克隆与互补验证第40-42页
        2.2.10 OsCUL3a组成型表达第42-43页
    2.3 小结第43-45页
        2.3.1 lm-ZH表现类病斑表型第43页
        2.3.2 lm-ZH中防卫信号被激活第43-44页
        2.3.3 OsCUL3a负调控水稻细胞死亡和免疫应激反应第44-45页
第三章 Os CUL3a功能分析第45-60页
    3.1 材料与方法第45-50页
        3.1.1 实验材料第45页
        3.1.2 实验方法第45-50页
            3.1.2.1 水稻原生质体瞬时表达系统第45-46页
            3.1.2.2 烟草瞬时表达系统第46页
            3.1.2.3 总蛋白提取第46页
            3.1.2.4 Western blotting第46-47页
            3.1.2.5 亚细胞定位第47页
            3.1.2.6 荧光素酶互补成像分析第47页
            3.1.2.7 双分子荧光互补第47页
            3.1.2.8 酵母双杂交第47-48页
            3.1.2.9 免疫共沉淀第48页
            3.1.2.10 MG132抑制OsNPR1降解实验第48页
            3.1.2.11 OsNPR1体内降解实验第48页
            3.1.2.12 CRISPR双突变体构建第48-50页
    3.2 结果与分析第50-56页
        3.2.1 OsCUL3a与OsRBX1a/b在体内互作第50-52页
        3.2.2 OsCUL3a和OsRBX1a/b的亚细胞定位第52页
        3.2.3 OsCUL3a与OsNPR1在体内互作第52-53页
        3.2.4 OsNPR1由 26S蛋白酶体途径降解第53-55页
        3.2.5 OsCUL3a在水稻体内介导OsNPR1的降解第55-56页
        3.2.6 oscul3a/osnpr1表型鉴定第56页
    3.3 讨论第56-60页
        3.3.1 OsCUL3a组装OsRBX1a或OsRBX1b形成CULLIN-Ring类E3泛素连接酶第56-58页
        3.3.2 OsCUL3a参与调控水稻免疫应激反应第58页
        3.3.3 OsNPR1正向调控水稻细胞死亡和免疫应激反应第58-60页
第四章 全文结论第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-72页
作者简历第72页

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