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利用荧光素酶片段互补技术构建REGγ与α7相互作用抑制剂筛选系统

内容摘要第6-7页
ABSTRACT第7页
第一章 文献综述第10-20页
    1 报告基因介导的蛋白质相互作用检测技术第10-14页
        1.1 能量共振转移技术第10-11页
        1.2 蛋白质片段互补技术技术第11-14页
            1.2.1 β-半乳糖苷酶片段互补技术第12页
            1.2.2 绿色荧光蛋白片段互补技术第12-13页
            1.2.3 荧光素酶片段互补技术第13-14页
    2 蛋白酶体第14-20页
        2.1 20S核心颗粒第14-15页
        2.2 ATP-依赖的激活因子-19S调节颗粒第15-16页
        2.3 ATP-非依赖的激活因子第16-20页
            2.3.1 Blm10/PA200第16-17页
            2.3.2 11S蛋白酶体激活因子第17-20页
第二章 材料与方法第20-33页
    1 实验材料第20-23页
    2 实验方法第23-33页
        2.1 质粒构建第23-26页
        2.2 细胞培养技术第26-27页
        2.3 质粒转染第27-29页
        2.4 多肽转染第29页
        2.5 荧光素酶活性检测(以24孔板的一个孔为例)第29页
        2.6 蛋白免疫印迹(Western Blotting)第29-31页
        2.7 免疫共沉淀(检测LucN-REGγ和α 7-LucC的相互作用)第31-32页
        2.8 细胞免疫荧光技术(以检测转染flag-REGγ为例)第32-33页
第三章 实验结果与分析第33-52页
    1 构建REGγ与α7相互作用的检测系统第33-36页
    2 突变LucN-REGγ提高系统的筛选效果第36-40页
    3 REGγ(NL)证明筛选系统的有效性第40-45页
    4 REGγ-10AA也许没有抑制REGγ与α7相互作用的能力第45-50页
    5 构建筛选抑制REGγ本身相互作用的抑制剂系统第50-52页
第四章 讨论与展望第52-54页
参考文献第54-62页
附录第62-64页
硕士期间科研成果第64-65页
致谢第65页

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