内容摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1 报告基因介导的蛋白质相互作用检测技术 | 第10-14页 |
1.1 能量共振转移技术 | 第10-11页 |
1.2 蛋白质片段互补技术技术 | 第11-14页 |
1.2.1 β-半乳糖苷酶片段互补技术 | 第12页 |
1.2.2 绿色荧光蛋白片段互补技术 | 第12-13页 |
1.2.3 荧光素酶片段互补技术 | 第13-14页 |
2 蛋白酶体 | 第14-20页 |
2.1 20S核心颗粒 | 第14-15页 |
2.2 ATP-依赖的激活因子-19S调节颗粒 | 第15-16页 |
2.3 ATP-非依赖的激活因子 | 第16-20页 |
2.3.1 Blm10/PA200 | 第16-17页 |
2.3.2 11S蛋白酶体激活因子 | 第17-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
1 实验材料 | 第20-23页 |
2 实验方法 | 第23-33页 |
2.1 质粒构建 | 第23-26页 |
2.2 细胞培养技术 | 第26-27页 |
2.3 质粒转染 | 第27-29页 |
2.4 多肽转染 | 第29页 |
2.5 荧光素酶活性检测(以24孔板的一个孔为例) | 第29页 |
2.6 蛋白免疫印迹(Western Blotting) | 第29-31页 |
2.7 免疫共沉淀(检测LucN-REGγ和α 7-LucC的相互作用) | 第31-32页 |
2.8 细胞免疫荧光技术(以检测转染flag-REGγ为例) | 第32-33页 |
第三章 实验结果与分析 | 第33-52页 |
1 构建REGγ与α7相互作用的检测系统 | 第33-36页 |
2 突变LucN-REGγ提高系统的筛选效果 | 第36-40页 |
3 REGγ(NL)证明筛选系统的有效性 | 第40-45页 |
4 REGγ-10AA也许没有抑制REGγ与α7相互作用的能力 | 第45-50页 |
5 构建筛选抑制REGγ本身相互作用的抑制剂系统 | 第50-52页 |
第四章 讨论与展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录 | 第62-64页 |
硕士期间科研成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |