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番茄灰霉病拮抗菌株的选育、基因改造及其发酵液大棚试验研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-24页
 1 番茄灰霉病的研究进展第12-17页
   ·番茄的简介第12页
   ·番茄灰霉病的发生第12-14页
   ·番茄灰霉病的防治方法第14-17页
 2 拮抗微生物的研究现状第17-22页
   ·生物防治第17-18页
   ·拮抗微生物第18-22页
 3 芽孢杆菌拮抗物质的研究第22页
   ·蛋白类抗菌物质第22页
   ·脂肽类物质第22页
   ·抗菌肽类第22页
 4 生物菌肥的研究第22-24页
第二章 番茄灰霉病广谱拮抗菌的分离筛选研究第24-33页
 引言第24页
 1 材料与方法第24-26页
   ·样品采集第24页
   ·供试植物病原真菌第24-25页
   ·培养基第25页
   ·仪器与设备第25页
   ·细菌、放线菌与丝状真菌的分离第25-26页
   ·广谱拮抗菌的初筛和复筛第26页
 2 结果与分析第26-32页
   ·拮抗菌株初筛的结果第26-29页
   ·广谱拮抗菌株复筛的结果第29-32页
 3 结论第32页
 4 讨论第32-33页
第三章 番茄灰霉病高效拮抗菌种属的初步鉴定第33-38页
 引言第33页
 1 材料与方法第33-35页
   ·菌种第33页
   ·培养基第33页
   ·仪器设备第33-34页
   ·拮抗细菌的形态鉴定第34页
   ·拮抗细菌生理生化鉴定第34-35页
 2 结果与分析第35-36页
   ·拮抗细菌的鉴定结果第35-36页
 3 结论第36页
 4 讨论第36-38页
第四章 通过导入几丁质酶基因提高菌株D2的拮抗能力第38-46页
 引言第38页
 1 材料与方法第38-40页
   ·菌株和质粒第38页
   ·酶和主要试剂第38-39页
   ·感受态细胞制备、重组质粒构建及转化第39页
   ·电穿孔细胞的制备及转化第39页
   ·野生菌与工程菌对病原菌防病效果的比较第39页
   ·菌株生长曲线及稳定性的测定第39-40页
   ·几丁质酶酶活测定第40页
 2 结果与分析第40-44页
   ·重组质粒的构建第40-41页
   ·电击转化第41-42页
   ·D_2与D_2-chib对病原菌抑菌效果的比较第42页
   ·菌株生长曲线和菌株稳定性的测定第42-44页
   ·几丁质酶酶活测定第44页
 3 结论第44页
 4 讨论第44-46页
   ·基因工程育种第44页
   ·工程菌株的外源蛋白的表达第44-46页
第五章 广谱拮抗芽孢杆菌D_2-chib发酵条件的研究第46-62页
 引言第46页
 1 材料与方法第46-49页
   ·菌种第46页
   ·培养基第46页
   ·主要试剂第46页
   ·仪器设备第46-47页
   ·菌体培养的方法第47页
   ·发酵液对番茄灰霉病的抗菌活性的测定第47页
   ·制霉菌素标准曲线的绘制第47页
   ·培养基的优化第47-48页
   ·发酵条件的优化第48-49页
 2 结果与分析第49-60页
   ·制霉菌素标准曲线的绘制第49-50页
   ·发酵培养基的优化结果第50-56页
   ·发酵条件的优化结果第56-60页
 3 结论第60-61页
 4 讨论第61-62页
第六章 工程菌株D_2-chib的大棚防病促生试验第62-68页
 引言第62页
 1 材料与方法第62-64页
   ·供试作物及靶标第62页
   ·供试生防菌株发酵液的制备第62页
   ·试验地点第62页
   ·试验方法第62-63页
   ·对番茄灰霉病的防治效果研究第63页
   ·菌株促生效果的测定第63页
   ·工程菌株D_2-chib在叶片和土壤的定植情况第63-64页
 2 结果与分析第64-67页
   ·对番茄灰霉病的防治效果第64-65页
   ·工程菌株D_2-chib的促生效果第65-66页
   ·工程菌株D_2-chib在叶片和土壤中的定植情况第66-67页
 3 结论第67页
 4 讨论第67-68页
   ·芽孢杆菌病原菌的定植竞争第67页
   ·芽孢杆菌的促生作用第67-68页
第七章 结论与讨论第68-72页
 1 主要研究成果第68页
 2 主要创新点第68-69页
 3 有待进一步研究的问题第69-70页
 4 展望第70-72页
参考文献第72-78页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第78-79页
致谢第79-80页
附录1第80-89页

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