摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 引言 | 第11-13页 |
2 材料与方法 | 第13-24页 |
2.1 材料 | 第13-16页 |
2.1.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.2 主要试剂及来源 | 第15页 |
2.1.3 主要仪器及设备 | 第15页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-24页 |
2.2.1 组织中线粒体DNA的提取 | 第16-17页 |
2.2.2 PCR实验主要操作流程图: | 第17-18页 |
2.2.3 mtDNA浓度和纯度的测定 | 第18页 |
2.2.4 引物设计及合成 | 第18-19页 |
2.2.5 PCR扩增mtDNA的目的基因 | 第19页 |
2.2.6 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第19-21页 |
2.2.7 PCR产物回收、纯化、测序 | 第21-22页 |
2.2.8 错义突变的功能性影响分析 | 第22页 |
2.2.9 免疫组化染色及评分 | 第22-23页 |
2.2.10 统计分析 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-141页 |
3.1 mtDNA编码区全部引物PCR产物扩增结果 | 第24-25页 |
3.2 食管鳞癌mtDNA编码区测序序列及测序峰图 | 第25-127页 |
3.3 mtDNA编码区基因组体细胞性和种系性突变 | 第127-128页 |
3.4 体细胞性和种系性错义突变的功能性影响分析 | 第128-129页 |
3.5 食管鳞癌中ND5基因上T13355A位点(F340Y)的测序结果 | 第129-137页 |
3.6 P-AMPK Thr172免疫组化结果推测食管鳞癌中F340Y突变与能量应激状态的关系 | 第137-141页 |
4 讨论 | 第141-147页 |
4.1 mtDNA的结构和功能 | 第141页 |
4.2 食管鳞癌中mtDNA编码区基因突变 | 第141-143页 |
4.3 食管鳞癌中F340Y突变与能量应激状态的关系 | 第143-147页 |
5 结论及创新点 | 第147-148页 |
参考文献 | 第148-152页 |
综述 | 第152-171页 |
参考文献 | 第165-171页 |
英文缩写词表 | 第171-172页 |
附录 | 第172-179页 |
作者简介及攻读硕士期间科研成果 | 第179-180页 |
致谢 | 第180页 |