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Kurthiahuakuii漆酶基因的克隆表达、蛋白纯化与酶学特性研究

摘要第6-7页
Abstract第7页
英文缩略表第12-13页
第一章 绪论第13-19页
    1.1 漆酶的种类第13-14页
        1.1.1 植物漆酶第13页
        1.1.2 昆虫漆酶第13-14页
        1.1.3 真菌漆酶第14页
        1.1.4 细菌漆酶第14页
    1.2 细菌漆酶研究进展第14-17页
        1.2.1 细菌漆酶的结构特征第14-15页
        1.2.2 细菌漆酶催化的底物第15页
        1.2.3 细菌漆酶的催化机理第15-16页
        1.2.4 细菌漆酶的应用前景第16-17页
            1.2.4.1 降解环境污染物第16页
            1.2.4.2 脱色有色工业废水第16-17页
            1.2.4.3 生物制浆第17页
            1.2.4.4 食品饮料工业第17页
            1.2.4.5 生物传感器第17页
    1.3 研究目的及内容第17-19页
        1.3.1 研究目的及意义第17-18页
        1.3.2 研究内容第18-19页
第二章 生物信息学分析第19-27页
    2.1 分析方法第19页
    2.2 分析结果第19-26页
        2.2.1 核苷酸和氨基酸序列分析第19-20页
        2.2.2 LaclK保守结构域预测第20-22页
        2.2.3 LaclK蛋白信号肽分析及跨膜区域的预测第22-23页
        2.2.4 LaclK蛋白的一级结构第23-24页
        2.2.5 LaclK二级结构预测第24页
        2.2.6 LaclK三级结构预测第24-25页
        2.2.7 脂肪族氨基酸指数和不稳定性系数的分析第25-26页
    2.3 本章小结第26-27页
第三章 原核表达菌株构建第27-34页
    3.1 实验材料和方法第27-30页
        3.1.1 实验材料第27-28页
        3.1.2 试验方法第28-30页
    3.2 结果与讨论第30-33页
        3.2.1 laclK基因的扩增第30-31页
        3.2.2 pET-28a质粒的提取与BamH I和Xho I双酶切验证第31-32页
        3.2.3 表达系统E. coli BL21(DE3)/pET28a-laclK的构建和测序验证第32-33页
    3.3 本章小结第33-34页
第四章 重组LaclK的表达和纯化第34-42页
    4.1 材料和方法第34-37页
        4.1.1 试验材料第34页
        4.1.2 试验方法第34-37页
    4.2 结果与讨论第37-41页
        4.2.1 BSA标准曲线的建立第37-38页
        4.2.2 重组LaclK的表达条件第38-40页
        4.2.3 LaclK蛋白的纯化第40-41页
    4.3 本章小结第41-42页
第五章 LaclK酶学性质研究第42-51页
    5.1 实验材料与方法第42-44页
        5.1.1 实验材料第42页
        5.1.2 实验方法第42-44页
    5.2 结果与讨论第44-50页
        5.2.1 LaclK的理化特征第44-45页
        5.2.2 LaclK的酶促反应动力学第45-49页
        5.2.3 LaclK的动力学常数第49-50页
    5.3 本章小结第50-51页
第六章 LaclK对染料的脱色研究第51-59页
    6.1 实验材料和方法第51-52页
        6.1.1 实验材料第51页
        6.1.2 实验方法第51-52页
    6.2 结果与讨论第52-58页
        6.2.1 LaclK的制备与酶活的测定第52-53页
        6.2.2 LaclK对不同结构染料的脱色第53-54页
        6.2.3 LaclK对乙基紫脱色的研究第54-58页
            6.2.3.1 给酶量对乙基紫脱色的影响第55页
            6.2.3.2 接种时间对乙基紫脱色的影响第55页
            6.2.3.3 乙基紫浓度对脱色的影响第55-56页
            6.2.3.4 pH对乙基紫脱色的影响第56页
            6.2.3.5 卤离子对乙基紫脱色的影响第56-57页
            6.2.3.6 有机试剂对乙基紫脱色的影响第57页
            6.2.3.7 NO~(3?),SO_4~(2?) 和腐殖酸对乙基紫脱色的影响第57-58页
    6.3 本章小结第58-59页
第七章 全文结论及展望第59-61页
    7.1 结论第59页
    7.2 展望第59-61页
参考文献第61-68页
附录第68-70页
致谢第70-71页
作者简历第71-72页

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