中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第11-12页 |
第2章 材料和方法 | 第12-28页 |
2.1 材料 | 第12-17页 |
2.1.1 实验细胞 | 第12页 |
2.1.2 实验试剂 | 第12-15页 |
2.1.3 实验耗材 | 第15-16页 |
2.1.4 实验仪器 | 第16-17页 |
2.2 乳腺癌相关LncRNA表达谱的建立和筛选 | 第17-21页 |
2.2.1 乳腺癌相关lncRNA引物设计 | 第17页 |
2.2.2 乳腺癌临床样本的收集和储存 | 第17页 |
2.2.3 乳腺癌组织RNA的抽提 | 第17-19页 |
2.2.4 乳腺癌细胞RNA的提取 | 第19页 |
2.2.5 RT-qPCR检测LncRNA在乳腺癌细胞中的表达 | 第19-21页 |
2.3 LncRNA CCAT2亚细胞定位 | 第21-23页 |
2.3.1 细胞的质核分离 | 第21-22页 |
2.3.2 蛋白质浓度测定 | 第22页 |
2.3.3 Western Blotting | 第22-23页 |
2.4 LncRNA CCAT2转染效率的检测 | 第23-25页 |
2.4.1 LncRNA CCAT2质粒抽提 | 第23-24页 |
2.4.2 瞬时转染 | 第24-25页 |
2.4.3 转染细胞RNA提取 | 第25页 |
2.4.4 取定量RNA做逆转录反应试验和qPCR | 第25页 |
2.5 LncRNA CCAT2对细胞增殖的影响 | 第25-27页 |
2.5.1 MTT检测细胞增殖 | 第25-26页 |
2.5.2 Ki67细胞免疫荧光染色 | 第26-27页 |
2.6 LncRNA CCAT2对细胞迁移的影响 | 第27页 |
2.6.1 Wound healing方法检测细胞迁移能力 | 第27页 |
2.7 统计学分析 | 第27-28页 |
第3章 结果 | 第28-39页 |
3.1 乳腺癌相关lncRNA表达谱的建立 | 第28-35页 |
3.1.1 细胞RNA提取报告及电泳图 | 第28-29页 |
3.1.2 乳腺癌lncRNA表达谱的设计和建立 | 第29-31页 |
3.1.3 乳腺癌lncRNA表达谱芯片的分析及验证 | 第31-35页 |
3.2 lncRNA CCAT2主要定位于细胞核内 | 第35-36页 |
3.3 lncRNA CCAT2上调抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖 | 第36-38页 |
3.4 lncRNA CCAT2上调抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移 | 第38-39页 |
第4章 结论与讨论 | 第39-43页 |
4.1 结论 | 第39页 |
4.2 进一步研究方向 | 第39-40页 |
4.3 讨论 | 第40-43页 |
4.3.1 乳腺癌相关lncRNA的筛选及研究困境 | 第40页 |
4.3.2 lncRNA CCAT2与人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖 | 第40-41页 |
4.3.3 lncRNA CCAT2与人乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移 | 第41-42页 |
4.3.4 lncRNA CCAT2调控乳腺癌发生发展的机制探讨 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
综述 | 第46-60页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |