| 英文缩写词表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 第一章：iRhom2及iRhom2~(mut)基因的获得 | 第19-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 其他试剂的配方 | 第19-20页 |
| 1.1.4 仪器 | 第20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 1.2.1 小鼠基因组DNA的制备 | 第20-21页 |
| 1.2.2 突变基因的验证 | 第21页 |
| 1.2.3 提取RNA | 第21页 |
| 1.2.4 反转录 | 第21-22页 |
| 1.2.5 PCR产物的扩增 | 第22-23页 |
| 1.2.6 PCR产物的回收和纯化 | 第23页 |
| 1.2.7 TA克隆的建立 | 第23-24页 |
| 1.2.8 连接产物的转化 | 第24页 |
| 1.2.9 阳性重组质粒的制备 | 第24页 |
| 1.3 结果 | 第24-26页 |
| 1.3.1 无毛小鼠皮肤RNA提取结果 | 第24-25页 |
| 1.3.2 目的基因编码区扩增 | 第25-26页 |
| 1.4 讨论 | 第26-28页 |
| 第二章：野生型iRhom2及其突变基因iRhom2~(mut)稳定表达细胞系的建立 | 第28-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 质粒和细胞 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 其他试剂配方 | 第28-29页 |
| 2.1.4 仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第29-30页 |
| 2.2.2 慢病毒表达载体的构建 | 第30页 |
| 2.2.3 重组质粒的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.4 病毒包装 | 第31页 |
| 2.2.5 病毒感染 | 第31页 |
| 2.2.6 稳定细胞系的建立 | 第31页 |
| 2.2.7 提取细胞总蛋白 | 第31页 |
| 2.2.8 BCA定量检测蛋白 | 第31-32页 |
| 2.2.9 Western Blot检测蛋白表达 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-37页 |
| 2.3.1 慢病毒重组质粒的鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3.2 重组慢病毒的包装结果 | 第34-35页 |
| 2.3.3 慢病毒滴度测定的结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 慢病毒感染Vero细胞的结果 | 第36页 |
| 2.3.5 目的蛋白表达的检测 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章：PKH26和Hoechst33258联合示踪目的蛋白 | 第39-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 细胞 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 PKH26对细胞膜的染色 | 第39页 |
| 3.2.2 Hoechst 33258对细胞核的染色 | 第39-40页 |
| 3.2.3 激光共聚焦显微镜观察 | 第40页 |
| 3.3 结果 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章：野生型iRhom2及iRhom2~(mut)对细胞生长特性的影响 | 第43-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 细胞 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第43-44页 |
| 4.2.2 野生型iRhom2及iRhom2~(mut)对Vero细胞活力的影响 | 第44页 |
| 4.2.3 野生型iRhom2及iRhom2~(mut)对Vero细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| 4.3 结果 | 第44-46页 |
| 4.3.1 WST-1 法检测Vero细胞的增殖 | 第44-45页 |
| 4.3.2 流式细胞术检测Vero细胞的凋亡 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-49页 |
| 第五章：结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 个人简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
