| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-27页 |
| 2.1 研究所需材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要实验设备 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第15-18页 |
| 2.2 基本实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 BubR1高表达肝癌细胞株的筛选 | 第18-21页 |
| 2.2.2 siRNA-BubR1的设计合成、分组及转染 | 第21-22页 |
| 2.2.3 siRNA -BubR1最佳沉默序列的筛选 | 第22页 |
| 2.2.4 细胞生物学活性实验 | 第22-23页 |
| 2.2.5 沉默BubR1对MAPKs、NF-κB信号通路及凋亡蛋白表达的影响 | 第23-24页 |
| 2.2.6 免疫共沉淀法检测HBx与BubR1是否结合形成复合体 | 第24-25页 |
| 2.2.7 双色免疫荧光结合激光共聚焦检测HBx与BubR1的细胞定位 | 第25页 |
| 2.3 统计学方法 | 第25-27页 |
| 第3章 结果 | 第27-34页 |
| 3.1 BubR1高表达细胞系的筛选 | 第27页 |
| 3.2 转染 | 第27-29页 |
| 3.2.1 转染效果 | 第27-28页 |
| 3.2.2 沉默BubR1基因对HepG2.2.15细胞BubR1 mRNA蛋白表达的影响 | 第28-29页 |
| 3.3 沉默BubR1基因对HepG2.2.15细胞生物活性的影响 | 第29-31页 |
| 3.3.1 MTT法检测细胞生长并绘制生长曲线 | 第29页 |
| 3.3.2 平板克隆形成实验结果 | 第29-30页 |
| 3.3.3 沉默BubR1基因对HepG2.2.15细胞周期的影响 | 第30页 |
| 3.3.4 沉默BubR1基因对HepG2.2.15细胞凋亡的影响 | 第30-31页 |
| 3.4 BubR1的信号通路机制研究 | 第31-32页 |
| 3.4.1 沉默BubR1对MAPKs、NF-κB通路蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 3.4.2 沉默BubR1对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.5 免疫共沉淀法证实HBx与BubR1具有结合能力 | 第32-33页 |
| 3.6 双色免疫荧光激光共聚焦证实HBx与BubR1细胞共定位 | 第33-34页 |
| 第4章 讨论 | 第34-38页 |
| 第5章 结论与展望 | 第38-39页 |
| 5.1 结论 | 第38页 |
| 5.2 展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 综述 | 第44-52页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
