| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 大豆胞囊线虫研究概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 大豆胞囊线虫特征及生活史 | 第12-13页 |
| 1.1.2 大豆胞囊线虫危害及分类系统 | 第13页 |
| 1.1.3 大豆胞囊线虫的分布 | 第13-14页 |
| 1.2 大豆对胞囊线虫抗性机制研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 根系分泌物与抗病的相关性 | 第14页 |
| 1.2.2 寄主的组织细胞学反应和生理生化反应 | 第14-16页 |
| 1.2.3 抗性位点拷贝数变异对大豆抗胞囊线虫的影响 | 第16页 |
| 1.3.大豆胞囊线虫抗性遗传基础 | 第16-20页 |
| 1.3.1 大豆胞囊线虫经典遗传学研究 | 第16-17页 |
| 1.3.2 大豆胞囊线虫抗性数量性状位点（QTL）的鉴定和定位 | 第17-20页 |
| 1.4 大豆胞囊线虫抗性相关基因 | 第20-21页 |
| 1.4.1 SCN抗性基因Rhg1 | 第20页 |
| 1.4.2 SCN抗性基因Rhg4 | 第20-21页 |
| 1.4.3 其他SCN抗性基因 | 第21页 |
| 1.5 本研究目标 | 第21-22页 |
| 第二章 大豆抗感品种接种胞囊线虫后根部异黄酮含量变化 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 大豆胞囊线虫胞囊分离、继代、计数 | 第22-23页 |
| 2.2.2 胞囊线虫接种 | 第23页 |
| 2.2.3 抗性鉴定 | 第23页 |
| 2.2.4 异黄酮提取 | 第23页 |
| 2.2.5 HPLC方法检测异黄酮含量 | 第23-24页 |
| 2.2.6 数据统计与分析 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.3.1 不同大豆品种对胞囊线虫4号生理小种抗性存在显著差异 | 第24页 |
| 2.3.2 不同抗感大豆品种的种子和根中异黄酮含量的差异 | 第24-27页 |
| 2.3.3 不同抗感大豆品种接种SCN4后根部异黄酮含量变化 | 第27-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 Rhg1和Rhg4等位位点与SCN4抗性的相关性分析 | 第32-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验材料与田间设计 | 第32页 |
| 3.1.2 工具酶及生化试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第33页 |
| 3.1.4 PCR引物 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 大豆叶片DNA的提取 | 第33-34页 |
| 3.2.2 目的片段的克隆PCR反应 | 第34-35页 |
| 3.2.3 Rhg4位点的单核苷酸多态性检测 | 第35页 |
| 3.2.4 Real-time PCR法检测Rhg4位点拷贝数 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 不同抗感胞囊线虫大豆品种（系）Rhg1位点拷贝数鉴定 | 第35-38页 |
| 3.3.2 抗感SCN4大豆品种（系）Rhg4位点SHMT基因编码区的单核苷酸多态性(SNP)扫描 | 第38-39页 |
| 3.3.3 RIL群体中Rhg1和Rhg4位点与SCN4抗性的关系 | 第39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 3.4.1 大豆胞囊线虫抗性位点Rhg1和Rhg4对SCN4的抗性是必要但非充分条件 | 第39页 |
| 3.4.2 Rhg4基因拷贝数的检测 | 第39-40页 |
| 3.4.3 与大豆胞囊线虫4号小种抗性位点紧密连锁的分子标记的开发 | 第40-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 大豆SCN4抗性相关基因的RNAi载体的构建与功能验证 | 第42-61页 |
| 4.1 实验材料 | 第42-44页 |
| 4.1.1 材料与菌株 | 第42页 |
| 4.1.2 工具酶及生化试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
| 4.1.4 PCR引物 | 第42-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-51页 |
| 4.2.1 大豆不同组织总RNA的提取 | 第44页 |
| 4.2.2 cDNA的合成 | 第44-45页 |
| 4.2.3 RNA干扰片段与p EASY-T1 Simple Cloning Vector的连接反应 | 第45页 |
| 4.2.4 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45-46页 |
| 4.2.5 质粒DNA的提取 | 第46-47页 |
| 4.2.6 目的片段的克隆PCR反应 | 第47页 |
| 4.2.7 PCR产物回收 | 第47-48页 |
| 4.2.8 农杆菌感受态的制备 | 第48-49页 |
| 4.2.9 植物表达载体导入感受态农杆菌K599（电击转化） | 第49页 |
| 4.2.10农杆菌菌液PCR | 第49-50页 |
| 4.2.11 Real-time PCR分析 | 第50页 |
| 4.2.12大豆发根异黄酮的提取及检测 | 第50页 |
| 4.2.13农杆菌接种 | 第50-51页 |
| 4.2.14带有阳性发根植株移栽及SCN4接种 | 第51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-59页 |
| 4.3.1 大豆SCN4抗性相关基因的克隆 | 第51-55页 |
| 4.3.2 RNA干扰表达元件分别与T载体连接测序 | 第55-56页 |
| 4.3.3 pGFPGUSplus-RNAi载体的构建 | 第56-57页 |
| 4.3.4 pGFPGUSplus-RNAi导入农杆菌株K599 | 第57页 |
| 4.3.5 大豆SCN抗性相关基因的沉默效率 | 第57-58页 |
| 4.3.6 RNAi植株雌虫指数鉴定 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 附录 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
