| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 双歧杆菌的概论 | 第13-15页 |
| 1.1.1 双歧杆菌 | 第13页 |
| 1.1.2 双歧杆菌的形态特征及分类 | 第13页 |
| 1.1.3 双歧杆菌的厌氧机制 | 第13-14页 |
| 1.1.4 双歧杆菌的保健功能 | 第14-15页 |
| 1.1.5 双歧杆菌的应用 | 第15页 |
| 1.2 诱变育种的概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 物理诱变 | 第16页 |
| 1.2.2 化学诱变 | 第16-17页 |
| 1.2.3 复合诱变 | 第17页 |
| 1.3 高密度培养 | 第17-18页 |
| 1.3.1 细胞生长环境的优化 | 第17页 |
| 1.3.2 培养模式的选择 | 第17页 |
| 1.3.3 诱导策略 | 第17-18页 |
| 1.3.4 细胞循环发酵 | 第18页 |
| 1.4 真空冷冻干燥及微胶囊化的概述 | 第18-19页 |
| 1.4.1 真空冷冻干燥概述 | 第18页 |
| 1.4.2 微胶囊的概述 | 第18-19页 |
| 1.5 双歧杆菌的国内外研究概况 | 第19页 |
| 1.6 课题目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.7 本课题的来源及主要研究内容 | 第20-21页 |
| 1.7.1 本课题的来源 | 第20页 |
| 1.7.2 主要研究内容 | 第20-21页 |
| 2 双歧杆菌耐性菌株的筛选 | 第21-31页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第21-22页 |
| 2.2.1 菌株来源 | 第21页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.2.4 培养基 | 第22页 |
| 2.2.5 试剂的配置 | 第22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 双歧杆菌的鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 菌种的活化 | 第23页 |
| 2.3.3 生长曲线的测定 | 第23页 |
| 2.3.4 活菌计数 | 第23页 |
| 2.3.5 紫外诱变 | 第23页 |
| 2.3.6 硫酸二乙酯诱变 | 第23页 |
| 2.3.7 复合诱变 | 第23-24页 |
| 2.3.8 菌体浓度的测定 | 第24页 |
| 2.3.9 pH的测定 | 第24页 |
| 2.3.10 紫外诱变前后形态对比 | 第24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.4.1 双歧杆菌的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4.2 生长曲线的测定 | 第25-26页 |
| 2.4.3 诱变剂量的确定 | 第26-27页 |
| 2.4.4 耐氧菌株的筛选 | 第27页 |
| 2.4.5 耐酸菌株的筛选 | 第27-28页 |
| 2.4.6 耐胆盐菌株的筛选 | 第28-29页 |
| 2.4.7 紫外诱变前后形态对比 | 第29-30页 |
| 2.5 本章小结 | 第30-31页 |
| 3 长双歧杆菌L80的高密度培养 | 第31-44页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第31-33页 |
| 3.2.1 菌株来源 | 第31页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.2.3 仪器与设备 | 第32页 |
| 3.2.4 培养基 | 第32-33页 |
| 3.3 试验方法 | 第33-34页 |
| 3.3.1 活菌计数 | 第33页 |
| 3.3.2 氮源的选择 | 第33页 |
| 3.3.3 碳源的选择 | 第33页 |
| 3.3.4 益生元的选择 | 第33页 |
| 3.3.5 响应曲面确定最佳配比 | 第33页 |
| 3.3.6 恒定pH的确定 | 第33页 |
| 3.3.7 温度的确定 | 第33页 |
| 3.3.8 流加补料时间的确定 | 第33-34页 |
| 3.3.9 残糖量的测定 | 第34页 |
| 3.3.10 pH的测定 | 第34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-42页 |
| 3.4.1 氮源的选择 | 第34-35页 |
| 3.4.2 碳源的选择 | 第35-36页 |
| 3.4.3 益生元的选择 | 第36-37页 |
| 3.4.4 响应曲面确定最佳配比 | 第37-40页 |
| 3.4.5 流加补料培养技术的研究 | 第40-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-44页 |
| 4 长双歧杆菌L80微胶囊化的研究 | 第44-57页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第44-46页 |
| 4.2.1 菌株来源 | 第44页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 4.2.3 仪器与设备 | 第45页 |
| 4.2.4 培养基 | 第45-46页 |
| 4.3 试验方法 | 第46-48页 |
| 4.3.1 菌悬液的制备 | 第46页 |
| 4.3.2 冻干菌粉的制备 | 第46页 |
| 4.3.3 菌剂的质量评定 | 第46页 |
| 4.3.4 冻干菌粉性质的检测 | 第46-47页 |
| 4.3.5 微胶囊的制备 | 第47页 |
| 4.3.6 壁材的制备 | 第47页 |
| 4.3.7 微胶囊性质的测定 | 第47页 |
| 4.3.8 微胶囊性质的测定 | 第47-48页 |
| 4.3.9 主要溶液的配制 | 第48页 |
| 4.4 结果与分析 | 第48-56页 |
| 4.4.1 单一保护剂的选择 | 第48-49页 |
| 4.4.2 复合保护剂的选择 | 第49-53页 |
| 4.4.3 冻干菌粉性质的检测 | 第53页 |
| 4.4.4 微胶囊性质的检测 | 第53-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 5 过氧化氢酶基因的克隆 | 第57-65页 |
| 5.1 引言 | 第57页 |
| 5.2 实验仪器与材料 | 第57-58页 |
| 5.2.1 菌株及载体 | 第57页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第57页 |
| 5.2.3 仪器与设备 | 第57-58页 |
| 5.2.4 培养基 | 第58页 |
| 5.3 试验方法 | 第58-60页 |
| 5.3.1 过氧化氢酶基因的克隆 | 第58-60页 |
| 5.3.2 CAT基因的生物信息学分析 | 第60页 |
| 5.4 结果与分析 | 第60-64页 |
| 5.4.1 总DNA的提取和过氧化氢酶的扩增 | 第60-61页 |
| 5.4.2 重组克隆质粒pET22b-cat的构建 | 第61页 |
| 5.4.3 CAT基因测序及生物信息学分析 | 第61-64页 |
| 5.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |