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基于Nrf2-ARE信号通路研究仙鹤草活性组分改善IR的作用机制

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-7页
缩略词第11-12页
1 绪论第12-16页
    1.1 课题的提出和研究意义第12-14页
    1.2 研究目的和研究内容第14-15页
        1.2.1 研究目的第14页
        1.2.2 研究内容第14-15页
    1.3 技术路线第15-16页
2 HepG2肝癌细胞IR模型的建立第16-26页
    2.1 引言第16页
    2.2 材料、试剂和仪器第16-17页
        2.2.1 材料第16页
        2.2.2 试剂第16-17页
        2.2.3 仪器第17页
    2.3 溶液的配制第17-18页
    2.4 实验方法第18-21页
        2.4.1 HepG2肝癌细胞的培养第18-19页
        2.4.2 HepG2人肝癌细胞胰岛素抵抗模型的建立第19页
        2.4.3 葡萄糖摄取实验第19-20页
        2.4.4 葡萄糖消耗实验第20页
        2.4.5 ROS的测定第20-21页
        2.4.6 统计方法第21页
    2.5 实验结果与结论第21-24页
        2.5.1 不同高糖浓度对HepG2细胞葡萄糖摄取的影响第21-22页
        2.5.2 不同浓度高糖培养液对HepG2细胞糖消耗的影响第22-23页
        2.5.3 不同高糖浓度对HepG2细胞内产生ROS水平的影响第23-24页
    2.6 小结第24-26页
3 仙鹤草活性组分对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响第26-34页
    3.1 引言第26页
    3.2 材料、试剂和仪器第26-27页
        3.2.1 材料第26-27页
        3.2.2 试剂第27页
        3.2.3 仪器第27页
    3.3 溶液的配制第27页
    3.4 实验方法第27-28页
        3.4.1 FC和TC组分对HepG2细胞增殖的影响第27-28页
        3.4.2 葡萄糖摄取实验第28页
        3.4.3 葡萄糖消耗实验第28页
        3.4.4 统计方法第28页
    3.5 实验结果与讨论第28-31页
        3.5.1 仙鹤草活性组分对HepG2细胞增殖的影响第28-29页
        3.5.2 仙鹤草活性组分对IR-HepG2细胞糖摄取的影响第29-30页
        3.5.3 仙鹤草活性组分对IR-HepG2细胞糖消耗的影响第30-31页
    3.6 小结第31-34页
4 仙鹤草活性组分通过Nrf2-ARE信号通路对胰岛素抵抗HepG2细胞氧化应激水平的调控第34-50页
    4.1 引言第34-35页
    4.2 材料、试剂和仪器第35-37页
        4.2.1 材料第35页
        4.2.2 试剂第35-36页
        4.2.3 仪器第36-37页
    4.3 溶液的配制第37页
    4.4 实验方法第37-44页
        4.4.1 ROS的测定第37页
        4.4.2 抗氧化酶SOD活性的检测第37-38页
        4.4.3 细胞氧化损伤标志物MDA的检测第38-39页
        4.4.4 细胞总mRNA的提取以及逆转录第39-41页
        4.4.5 荧光定量PCR第41-42页
        4.4.6 细胞全蛋白的制备第42-43页
        4.4.7 细胞蛋白浓度的测定第43-44页
        4.4.8 统计方法第44页
    4.5 实验结果与讨论第44-49页
        4.5.1 仙鹤草对胰岛素抵抗模型细胞内ROS水平的影响第44-45页
        4.5.2 仙鹤草对胰岛素抵抗模型细胞内抗氧化酶SOD活性的影响第45页
        4.5.3 仙鹤草对胰岛素抵抗模型细胞内氧化性损伤标志物MDA水平的影响第45-46页
        4.5.4 仙鹤草对胰岛素抵抗模型Nrf2-ARE信号通路中Nrf2以及下游抗氧化酶基因NQO1,HO-1,γ-GCS和GSH-Px转录水平的调控第46-49页
    4.6 小结第49-50页
5 仙鹤草活性组分对胰岛素抵抗HepG2细胞中JNK和IRS-1/PI3K/Akt信号途径的调控第50-64页
    5.1 引言第50页
    5.2 材料、试剂和仪器第50页
    5.3 Western blot主要试剂的配制第50-51页
    5.4 实验方法第51-54页
        5.4.1 细胞mRNA的提取以及逆转录第51页
        5.4.2 荧光定量PCR第51页
        5.4.3 细胞全细胞蛋白的制备第51-52页
        5.4.4 细胞蛋白浓度的测定第52页
        5.4.5 Western Blot第52-54页
        5.4.6 统计方法第54页
    5.5 实验结果与讨论第54-61页
        5.5.1 仙鹤草对胰岛素抵抗模型细胞JNK和IRS-1/PI3K/Akt信号通路相关基因mRNA表达的影响第54-56页
        5.5.2 仙鹤草活性组分对IR-HepG2细胞中JNK蛋白磷酸化的影响第56-58页
        5.5.3 仙鹤草对胰岛素抵抗模型细胞IRS-1/PI3K/Akt信号通路蛋白的表达和磷酸化的调控第58-61页
    5.6 小结第61-64页
6 结论及后续工作建议第64-68页
    6.1 结论第64-66页
    6.2 后续工作建议第66-68页
致谢第68-70页
参考文献第70-78页
附录第78页
    A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文题目第78页
    B. 作者在攻读硕士学位期间参与的科研项目第78页

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