| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 生物质能源的开发 | 第9-10页 |
| 1.2 木质纤维素简介 | 第10-11页 |
| 1.3 木质纤维素的生物炼制 | 第11页 |
| 1.4 纤维素降解微生物 | 第11-12页 |
| 1.5 纤维素酶系及其协同机制 | 第12-13页 |
| 1.6 纤维素酶活力表征 | 第13-14页 |
| 1.6.1 单一纤维素酶组分酶活测定 | 第13-14页 |
| 1.6.2 总酶活力的测定 | 第14页 |
| 1.7 枯草杆菌表达系统概述 | 第14-16页 |
| 1.8 纤维素酶在枯草杆菌中的表达 | 第16-17页 |
| 1.9 课题的研究内容与意义 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 培养基,培养条件及主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验及分析方法 | 第22-36页 |
| 2.2.1 基因组DNA的制备和质粒抽提 | 第22-23页 |
| 2.2.2 目的基因的克隆 | 第23-26页 |
| 2.2.3 大肠杆菌DH5a感受态的制备和转化 | 第26-27页 |
| 2.2.4 大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体重组质粒的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.5 重组质粒在大肠杆菌中的PCR鉴定 | 第29页 |
| 2.2.6 重组质粒在大肠杆菌中的酶活鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.7 枯草杆菌化学感受态的制备和转化 | 第30页 |
| 2.2.8 枯草杆菌重组菌的鉴定和培养 | 第30-31页 |
| 2.2.9 枯草杆菌WB800(WB600)生长曲线的制作 | 第31页 |
| 2.2.10 重组菌对纤维二糖的利用 | 第31-32页 |
| 2.2.11 重组枯草杆菌的酶活测定 | 第32-36页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第36-66页 |
| 3.1 多粘芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因bglA的克隆及其在枯草杆菌中表达 | 第36-41页 |
| 3.1.1 β-葡萄糖苷酶基因bglA的克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.2 pMA5-bglA重组质粒的构建 | 第37-39页 |
| 3.1.3 重组质粒pMA5-bglA在枯草杆菌中的表达 | 第39-41页 |
| 3.2 多粘芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因bglA的克隆及其在枯草杆菌中的分泌型表达 | 第41-46页 |
| 3.2.1 bglA基因的克隆 | 第41-42页 |
| 3.2.2 pP43JM2-bglA重组表达质粒的构建 | 第42-44页 |
| 3.2.3 重组质粒pP43JM2-bglA在枯草杆菌中的分泌表达 | 第44-46页 |
| 3.3 多粘芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因bglB的克隆及其在枯草杆菌中的分泌型表达 | 第46-49页 |
| 3.3.1 β-葡萄糖苷酶基因bglB的克隆 | 第46-47页 |
| 3.3.2 pP43JM2-bglB重组表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.3 重组质粒pP43JM2-bglB在枯草杆菌中的分泌型表达 | 第48-49页 |
| 3.4 耐热内切葡聚糖酶celA与β-葡萄糖苷酶bglA基因在枯草杆菌中的共表达 | 第49-56页 |
| 3.4.1 celAbglA共表达基因的克隆 | 第49-50页 |
| 3.4.2 pP43JM2-celAbglA重组表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 3.4.3 重组质粒pP43JM2-celAbglA在枯草杆菌中的分泌型共表达 | 第51-53页 |
| 3.4.4 bglAcelA共表达基因的克隆 | 第53-54页 |
| 3.4.5 pP43JM2-bglAcelA重组表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 3.4.6 重组质粒pP43JM2-bglAcelA在枯草杆菌中的分泌型共表达 | 第55-56页 |
| 3.5 耐热内切葡聚糖酶celA与β-葡萄糖苷酶bglB基因在枯草杆菌中的分泌型共表达 | 第56-62页 |
| 3.5.1 celAbglB共表达基因的克隆 | 第56-57页 |
| 3.5.2 pP43JM2-celAbglB重组表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3.5.3 重组质粒pP43JM2-celAbglB在枯草杆菌中的分泌型共表达 | 第58-59页 |
| 3.5.4 bglBcelA共表达基因的克隆 | 第59-60页 |
| 3.5.5 pP43JM2-bglBcelA重组表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 3.5.6 重组质粒pP43JM2-bglBcelA在枯草杆菌中的分泌型共表达 | 第61-62页 |
| 3.6 内切葡聚糖酶与β-葡萄糖苷酶基因在枯草杆菌中的共表达及酶活比较 | 第62-66页 |
| 第四章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
