| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第1章 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 胃腺癌概述 | 第10页 |
| 1.2 肿瘤干细胞标记物CD44 | 第10-11页 |
| 1.3 干细胞标志物Nanog | 第11-12页 |
| 1.4 miRNA概述 | 第12-13页 |
| 1.4.1 miRNA的发现 | 第12页 |
| 1.4.2 miRNA的产生 | 第12页 |
| 1.4.3 miRNA的功能 | 第12-13页 |
| 1.4.4 miRNA与癌症关系 | 第13页 |
| 1.4.5 miR-199b-5p | 第13页 |
| 1.5 本论文研究内容 | 第13-15页 |
| 第2章 胃癌细胞与胃癌肿瘤干细胞中差异化表达的miRNA初步筛选 | 第15-24页 |
| 2.1 研究材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 实验所需试剂及材料 | 第15-16页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制方法 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-21页 |
| 2.2.1 MGC803细胞及其微囊球细胞的培养 | 第16-18页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第18页 |
| 2.2.3 送样测序 | 第18页 |
| 2.2.4 测序结果分析及筛选 | 第18-19页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR验证测序结果 | 第19-21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-23页 |
| 2.3.1 测序前提取RNA的质量检测 | 第21页 |
| 2.3.2 差异表达的miRNA的初步筛选 | 第21-22页 |
| 2.3.3 差异表达的miRNA的qRT-PCR验证: | 第22-23页 |
| 2.4 本章小结 | 第23-24页 |
| 第3章 预测与Nanog及CD44相关的miRNA | 第24-38页 |
| 3.1 研究材料 | 第24-28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 3.1.3 实验所需试剂及材料 | 第25页 |
| 3.1.4 试剂的配制 | 第25-28页 |
| 3.2 研究方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 生物信息学结合测序结果共同预测上游靶向Nanog和CD44 3'UTR的miRNA | 第28页 |
| 3.2.2 验证胃腺癌中可与Nanog、CD44相关的miRNA | 第28-31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-37页 |
| 3.3.1 生物信息学预测与Nanog和CD44有关的miRNA | 第31-34页 |
| 3.3.2 验证miR-199b-5p在MGC803细胞中与Nanog和CD44基因关系 | 第34-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第4章 过表达miR-199b-5p对胃腺癌细胞MGC803的生物学功能影响 | 第38-49页 |
| 4.1 研究材料 | 第38-40页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 4.1.3 实验所需试剂 | 第39页 |
| 4.1.4 培养液及溶液的配制 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 MGC803细胞的培养 | 第40页 |
| 4.2.2 miR-199b-5p mimic和NC的转染MGC803细胞及表达 | 第40页 |
| 4.2.3 检测过表达的miR-199b-5p对人胃腺癌细胞MGC803细胞行为学影响 | 第40-42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-48页 |
| 4.3.1 miR-199b-5p mimic和miR-199b-5p NC表达转染效率结果 | 第42页 |
| 4.3.2 过表达miR-199b-5p对胃腺癌细胞MGC803的生物学功能影响结果 | 第42-48页 |
| 4.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第59页 |
