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氧化—内质网应激信号途径在弓形虫感染致胎盘滋养细胞凋亡中的作用研究

英文缩略词对照表第1-10页
中文摘要第10-14页
Abstract第14-20页
1 前言第20-26页
第一部分:弓形虫孕期急性感染小鼠模型的建立及母胎界面氧化应激反应的研究第26-59页
 研究背景第26-27页
 2 材料与方法第27-46页
   ·研究对象第27页
   ·主要试剂第27-28页
   ·部分试剂的配制第28-30页
   ·主要仪器及来源第30-32页
   ·实验方法第32-46页
     ·弓形虫RH株速殖子的复苏与冻存第32页
     ·小鼠弓形虫感染传代及弓形虫速殖子的收集第32页
     ·建立稳定的弓形虫感染孕期小鼠模型第32-33页
     ·标本收集,RNA提取和质量鉴定第33-36页
     ·逆转录反应第36-37页
     ·PCR Assay分析胎盘氧化/抗氧化相关基因转录水平第37-39页
     ·胎盘组织和外周血弓形虫含量定量检测第39-40页
     ·胎盘组织匀浆和蛋白浓度测定第40-41页
     ·胎盘组织匀浆还原型谷胱甘肽测定第41-44页
     ·胎盘组织匀浆脂质氧化产物丙二醛检测第44-45页
     ·胎盘组织匀浆 8 羟基脱氧鸟苷含量测定第45-46页
     ·数据处理和统计分析第46页
 3 结果第46-57页
   ·弓形虫孕期急性感染小鼠模型数据第46-47页
   ·胎盘组织RNA浓度和质量测定第47-48页
   ·弓形虫感染及NAC预处理对胎盘组织氧化/抗氧化基因转录水平的影响第48-52页
   ·不同孕天孕鼠外周血及胎盘组织弓形虫负荷第52-53页
   ·三组不同孕天胎盘组织匀浆还原性谷胱甘肽的含量第53-54页
   ·三组不同孕天胎盘组织匀浆丙二醛的含量第54-55页
   ·三组不同孕天胎盘组织匀浆8羟基脱氧鸟苷的含量第55-57页
 4 小结第57-59页
第二部分:氧化-内质网应激在弓形虫感染致胎盘滋养细胞凋亡中的作用及 N-乙酰半胱氨酸干预研究第59-98页
 研究背景第59-61页
 2 材料与方法第61-76页
   ·研究对象第61页
   ·抗体和试剂第61-62页
   ·部分试剂的配制第62-64页
   ·主要仪器和来源第64-65页
   ·实验方法第65-76页
     ·实验分组和处理第65页
     ·胎盘组织标本的收集和处理第65-66页
     ·胎盘细胞悬液的制备第66页
     ·滋养细胞的分离和原代培养第66-67页
     ·原代培养的滋养细胞免疫学鉴定第67-68页
     ·Transwell体外弓形虫感染实验第68页
     ·胎盘细胞悬液和原代培养滋养细胞的流式凋亡分析第68-69页
     ·TUNEL原位分析胎盘组织凋亡水平第69页
     ·原代培养细胞GSH水平测定第69-70页
     ·荧光定量PCR检测氧化-内质网应激相关分子的转录水平第70-72页
     ·胎盘组织和原代培养滋养细胞蛋白的提取第72-73页
     ·Western blot分析内质网应激和前凋亡途径相关标记物第73-76页
     ·数据处理和统计分析第76页
 3 结果第76-92页
   ·滋养细胞原代培养形态和免疫学鉴定第76-78页
   ·不同孕天胎盘细胞悬液流式凋亡检测结果第78-80页
   ·原代培养滋养细胞的流式凋亡检测结果第80-82页
   ·TUNEL原位分析胎盘组织凋亡水平第82-84页
   ·荧光定量PCR检测氧化-内质网应激相关分子的转录水平第84-86页
   ·NAC预处理对胎盘和原代培养的滋养细胞凋亡水平的影响第86-87页
   ·弓形虫感染对体外共培养的滋养细胞氧化/抗氧化关键基因转录水平和细胞内GSH水平的影响第87-89页
   ·弓形虫感染对体外共培养的滋养细胞多种前凋亡通路活化的影响第89-90页
   ·弓形虫感染对胎盘组织内质网应激和前凋亡通路的活化及NAC对其抑制作用第90-92页
 4 小结第92-93页
 5 讨论第93-98页
参考文献第98-106页
附录第106-109页
致谢第109-110页
综述第110-117页
 参考文献第115-117页

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