| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-29页 |
| 第一章 多杀性巴氏杆菌肺炎的研究进展 | 第15-26页 |
| 1.1 多杀性巴氏杆菌简介 | 第15页 |
| 1.2 多杀性巴氏杆菌肺炎 | 第15-18页 |
| 1.2.1 致病的毒力因子 | 第15-16页 |
| 1.2.1.1 脂多糖 | 第15-16页 |
| 1.2.1.2 外膜蛋白 | 第16页 |
| 1.2.1.3 荚膜 | 第16页 |
| 1.2.2 临床症状 | 第16-17页 |
| 1.2.2.1 禽巴氏杆菌病 | 第16-17页 |
| 1.2.2.2 猪巴氏杆菌病 | 第17页 |
| 1.2.2.3 牛巴氏杆菌病 | 第17页 |
| 1.2.2.4 兔巴氏杆菌病 | 第17页 |
| 1.2.2.5 鹿巴氏杆菌病 | 第17页 |
| 1.2.3 预防与治疗 | 第17-18页 |
| 1.3 炎性因子和 SOD 在炎症中的作用 | 第18-20页 |
| 1.3.1 肿瘤坏死因子-α（TNF-α） | 第18页 |
| 1.3.2 白介素-1（IL-1） | 第18-19页 |
| 1.3.3 白介素-6（IL-6） | 第19页 |
| 1.3.4 白介素-8（IL-8） | 第19页 |
| 1.3.5 活性氧 (ROS) | 第19-20页 |
| 1.3.6 过氧化物歧化酶 (SOD) | 第20页 |
| 1.4 炎性通路的研究进展 | 第20-26页 |
| 1.4.1 脂多糖诱导的主要信号转导通路 | 第20-21页 |
| 1.4.2 Nrf-2 信号转导通路 | 第21-26页 |
| 1.4.2.1 Nrf-2 的基本结构和功能 | 第21-22页 |
| 1.4.2.2 Keap-1 的基本结构和功能 | 第22页 |
| 1.4.2.3 Nrf-2 的激活机制 | 第22-23页 |
| 1.4.2.3.1 Nrf-2 直接磷酸化 | 第22页 |
| 1.4.2.3.2 Keap-1 构象改变 | 第22-23页 |
| 1.4.2.3.3 竞争性抑制方式 | 第23页 |
| 1.4.2.4 Nrf-2 调节的主要基因 | 第23-26页 |
| 1.4.2.4.1 麸胱肽合成酶（GCL） | 第23页 |
| 1.4.2.4.2 谷胱甘肽硫转移酶（GST） | 第23-24页 |
| 1.4.2.4.3 NADPH 醌氧化还原酶 1（NQO1） | 第24页 |
| 1.4.2.4.4 超氧化物歧化酶（SOD） | 第24页 |
| 1.4.2.4.5 环氧水解酶（EHs） | 第24-25页 |
| 1.4.2.4.6 血红素氧合酶-1（HO-1） | 第25-26页 |
| 第二章 芳樟醇的研究进展 | 第26-29页 |
| 2.1 芳樟醇的化学结构 | 第26页 |
| 2.2 芳樟醇的理化性质 | 第26-27页 |
| 2.3 芳樟醇的人工合成 | 第27页 |
| 2.4 芳樟醇的药理作用 | 第27-28页 |
| 2.4.1 镇静作用 | 第27页 |
| 2.4.2 抑制细胞增殖的作用 | 第27页 |
| 2.4.3 抗龋齿作用 | 第27页 |
| 2.4.4 抑菌作用 | 第27-28页 |
| 2.5 结语 | 第28-29页 |
| 第二篇 实验部分 | 第29-57页 |
| 第一章 芳樟醇对 Nrf-2 信号转导通路的调控 | 第29-38页 |
| 1.1 材料 | 第29-31页 |
| 1.1.1 细胞 | 第29页 |
| 1.1.2 药品和试剂 | 第29-30页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 1.1.4 实验所用试剂的配置 | 第30-31页 |
| 1.2 方法 | 第31-34页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第31页 |
| 1.2.2 MTT 法测定芳樟醇的细胞毒性 | 第31-32页 |
| 1.2.3 Western blot 法检测 Nrf-2、HO-1 的蛋白表达 | 第32-33页 |
| 1.2.3.1 细胞培养 | 第32页 |
| 1.2.3.2 提取蛋白样品并测定其含量 | 第32页 |
| 1.2.3.3 SDS-PAGE 电泳 | 第32-33页 |
| 1.2.4 EMSA 法检测 Nrf-2 蛋白 DNA 的结合活性 | 第33-34页 |
| 1.2.4.1 细胞培养、细胞核蛋白提取以及核蛋白定量分别按“2.3.1”与“2.3.2”进行 | 第33页 |
| 1.2.4.2 探针合成 | 第33页 |
| 1.2.4.3 EMSA 反应体系配置 | 第33页 |
| 1.2.4.4 电泳 | 第33-34页 |
| 1.2.5 数据处理及统计学分析 | 第34页 |
| 1.3 结果 | 第34-36页 |
| 1.3.1 芳樟醇对细胞活性的影响 | 第34页 |
| 1.3.2 芳樟醇对 Nrf-2 通路的影响 | 第34-36页 |
| 1.3.3 芳樟醇对 Nrf-2 蛋白 DNA 结合活性的影响 | 第36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-37页 |
| 1.5 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 Nrf-2 在多杀性巴氏杆菌诱导炎症中的作用 | 第38-47页 |
| 2.1 材料 | 第38-40页 |
| 2.1.1 细胞 | 第38页 |
| 2.1.2 菌株 | 第38页 |
| 2.1.3 药品和试剂 | 第38页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.1.5 实验所用试剂的配置 | 第39-40页 |
| 2.2 方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 2.2.2 应用荧光定量 PCR 和 Western Blot 检测 Nrf-2 干扰 RNA | 第40-42页 |
| 2.2.2.1 siRNA | 第40页 |
| 2.2.2.2 细胞接板及转染 | 第40-41页 |
| 2.2.2.3 荧光定量 PCR 检测干扰效率 | 第41-42页 |
| 2.2.2.3.1 引物设计 | 第41页 |
| 2.2.2.3.2 总 RNA 提取 | 第41页 |
| 2.2.2.3.3 逆转录成 cDNA | 第41页 |
| 2.2.2.3.4 实时荧光定量 PCR 扩增 | 第41-42页 |
| 2.2.2.4 Western Blot 检测干扰效率 | 第42页 |
| 2.2.2.4.1 转染及芳樟醇处理 | 第42页 |
| 2.2.2.4.2 细胞核蛋白的提取 | 第42页 |
| 2.2.2.4.3 SDS-PAGE 电泳 | 第42页 |
| 2.2.3 ELISA 检测细胞因子 TNF-α，IL-6 的浓度 | 第42-43页 |
| 2.2.4 数据处理及统计学分析 | 第43页 |
| 2.3 结果 | 第43-45页 |
| 2.3.1 荧光定量 PCR 检测 Nrf-2 mRNA 的表达 | 第43-44页 |
| 2.3.2 Western Blot 检测 Nrf-2 蛋白的表达 | 第44页 |
| 2.3.3 Nrf-2 在多杀性巴氏杆菌诱导炎症中的作用及芳樟醇对细胞因子的影响 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 芳樟醇对小鼠多杀性巴氏杆菌肺炎的抑制作用 | 第47-57页 |
| 3.1 材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 菌株 | 第47页 |
| 3.1.2 动物 | 第47页 |
| 3.1.3 药品和试剂 | 第47-48页 |
| 3.1.4 仪器 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 小鼠多杀性巴氏杆菌肺炎模型的建立及给药方案 | 第48页 |
| 3.2.1.1 实验分组 | 第48页 |
| 3.2.1.2 小鼠经鼻接种多杀性巴氏杆菌 | 第48页 |
| 3.2.1.3 给药方案 | 第48页 |
| 3.2.2 保护率实验 | 第48-49页 |
| 3.2.3 髓过氧化物酶（MPO）的测定 | 第49页 |
| 3.2.4 组织病理学研究 | 第49页 |
| 3.2.5 炎性细胞因子测定 | 第49页 |
| 3.2.6 肺湿重/干重比测定 | 第49页 |
| 3.2.7 BALF 分析 | 第49-50页 |
| 3.2.7.1 BALF 的收集 | 第50页 |
| 3.2.7.2 活性氧（ROS）测定 | 第50页 |
| 3.2.7.3 超氧化物歧化酶（SOD）测定 | 第50页 |
| 3.2.8 数据处理及统计学分析 | 第50-51页 |
| 3.3 结果 | 第51-55页 |
| 3.3.1 芳樟醇对小鼠多杀性巴氏杆菌肺炎死亡率的影响 | 第51页 |
| 3.3.2 芳樟醇对多杀性巴氏杆菌肺炎小鼠肺组织中 MPO 活性的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.3 芳樟醇对小鼠肺脏组织病理学特征的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.4 芳樟醇对多杀性巴氏杆菌肺炎小鼠肺脏中细胞因子含量的影响 | 第53页 |
| 3.3.5 芳樟醇对多杀性巴氏杆菌肺炎小鼠肺组织湿重/干重（W/D）的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.6 芳樟醇对多杀性巴氏杆菌肺炎小鼠 BALF 中 ROS 和 SOD 活性的影响 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
