| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-37页 |
| ·冷激蛋白家族 | 第17-23页 |
| ·原核生物的冷激蛋白 | 第18-20页 |
| ·真核生物的Y-box 结合蛋白 | 第20-23页 |
| ·冷激蛋白的结构与功能分析 | 第23-25页 |
| ·冷激蛋白的调控机制 | 第25-31页 |
| ·转录水平的调控 | 第25-27页 |
| ·转录后水平的调控 | 第27-28页 |
| ·翻译水平的调控 | 第28-31页 |
| ·冷激蛋白的应用 | 第31-33页 |
| ·耐辐射微生物中的冷激蛋白 | 第33-36页 |
| ·立题依据 | 第36-37页 |
| 第二章 戈壁异常球菌冷激蛋白的鉴定 | 第37-61页 |
| ·材料与方法 | 第37-48页 |
| ·实验菌株 | 第37页 |
| ·酶、试剂盒及主要生化试剂 | 第37-38页 |
| ·培养基及主要溶液配制 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·基因组DNA、质粒DNA 提取 | 第39-40页 |
| ·PCR 反应 | 第40-42页 |
| ·DNA 片段的回收与纯化 | 第42-43页 |
| ·DNA 片段的酶切与连接 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与热激转化 | 第43-44页 |
| ·冻融存活曲线的测定 | 第44页 |
| ·低温条件下细胞生长曲线测定 | 第44页 |
| ·融合蛋白的表达与纯化 | 第44-46页 |
| ·蛋白的浓缩 | 第46页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第46-48页 |
| ·蛋白三级结构模拟 | 第48页 |
| ·结果分析 | 第48-58页 |
| ·蛋白结构分析 | 第48-50页 |
| ·Csps 表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·Csps 表达对菌株抗冻特性的影响 | 第52页 |
| ·Csps 表达对菌株生长的影响 | 第52-54页 |
| ·Csp-His 融合蛋白的纯化 | 第54-55页 |
| ·低温生长条件下细胞中蛋白的表达 | 第55-56页 |
| ·凝胶阻滞实验分析ssDNA 与Csps 蛋白互作 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·Csps 蛋白结构分析 | 第58页 |
| ·Csps 蛋白功能鉴定 | 第58-59页 |
| ·Csps 蛋白的表达 | 第59-60页 |
| ·Csps 与核苷酸的结合 | 第60-61页 |
| 第三章 冷激蛋白增强大肠杆菌非生物胁迫抗性 | 第61-71页 |
| ·材料与方法 | 第61-65页 |
| ·实验菌株 | 第61页 |
| ·酶、试剂盒及主要生化试剂 | 第61页 |
| ·培养基及主要溶液配制 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·细菌总RNA 的提取与纯化 | 第61-62页 |
| ·cDNA 的合成 | 第62-63页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第63-64页 |
| ·限制性培养基M9 中细胞生长曲线的测定 | 第64-65页 |
| ·UV 辐照存活曲线的测定 | 第65页 |
| ·盐冲击实验 | 第65页 |
| ·山梨醇冲击实验 | 第65页 |
| ·结果分析 | 第65-69页 |
| ·Csps 促进细胞在限制性培养基中的生长 | 第65-66页 |
| ·Csp2 增强大肠杆菌对UV 辐射的耐受性 | 第66-67页 |
| ·Csp2 增强大肠杆菌高渗胁迫抗性 | 第67页 |
| ·Csp2 增强大肠杆菌盐协迫抗性 | 第67页 |
| ·Csp2 表达菌株中DNA 修复相关基因的表达水平 | 第67-68页 |
| ·Csp2 表达菌株中渗透胁迫相关基因的表达水平 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·UV 辐射抗性 | 第69-70页 |
| ·渗透胁迫抗性 | 第70-71页 |
| 第四章 转csp2 基因烟草的构建及其干旱胁迫抗性分析 | 第71-85页 |
| ·材料与方法 | 第71-80页 |
| ·植物材料与实验菌株 | 第71页 |
| ·酶、试剂盒及主要生化试剂 | 第71页 |
| ·培养基及主要溶液配制 | 第71-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·根癌农杆菌Agrobactium tumefaciens LBA4404 感受态细胞制备 | 第74页 |
| ·冻融法转化农杆菌LBA4404 | 第74-75页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化体系 | 第75页 |
| ·烟草基因组DNA 提取 | 第75页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第75-76页 |
| ·转基因烟草的Southern-blot 检测 | 第76-78页 |
| ·转基因烟草的Western-blot 检测 | 第78-79页 |
| ·转基因植株的移栽 | 第79页 |
| ·转基因烟草抗旱分析 | 第79-80页 |
| ·结果分析 | 第80-83页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第80-81页 |
| ·转csp2 基因烟草的获得 | 第81-82页 |
| ·转csp2 基因烟草Southern 杂交检测 | 第82页 |
| ·转csp2 基因烟草Western 杂交检测 | 第82页 |
| ·转csp2 基因烟草抗旱性性状观察与分析 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| 第五章 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简历 | 第98页 |
