摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料与方法 | 第9-19页 |
1 主要试剂及来源 | 第9-10页 |
2 主要仪器及来源 | 第10页 |
3 主要溶液的配制 | 第10-11页 |
4 细胞培养 | 第11-13页 |
4.1 乳腺癌BT-549、MDA-MB-468、MCF-7细胞的培养(传代和换液) | 第11-12页 |
4.2 细胞冻存 | 第12页 |
4.3 细胞复苏 | 第12-13页 |
5 Real-time PCR筛选出Prrx1低表达乳腺癌细胞株 | 第13-14页 |
5.1 细胞总RNA提取 | 第13页 |
5.2 反转录反应 | 第13页 |
5.3 GAPDH、Prrx1、波形蛋白和E-钙黏蛋白的引物序列 | 第13-14页 |
5.4 Real-time PCR筛选Prrx1低表达乳腺癌细胞株 | 第14页 |
6 慢病毒载体构建和转染情况 | 第14-15页 |
7 Transwell法检测Prrx1过表达对MCF-7细胞迁移能力的影响 | 第15页 |
8 Western blot检测Twist1及ABCB1的表达 | 第15-17页 |
8.1 蛋白的提取 | 第15-16页 |
8.2 蛋白浓度的测定 | 第16-17页 |
9 CCK-8检测细胞IC50 | 第17-18页 |
10 流式细胞仪检测Docetaxel对三组细胞凋亡率的影响 | 第18页 |
11 统计学方法 | 第18-19页 |
结果 | 第19-26页 |
1 从乳腺癌MCF-7、BT-549 和MDA-MB-468细胞中筛选出Prrx1mRNA低表达乳腺癌细胞株 | 第19页 |
2 荧光显微镜观察慢病毒感染MCF-7细胞后绿色荧光蛋白的表达 | 第19-21页 |
3 实验组、空白对照组和阴性对照组中Prrx1、波形蛋白和E-钙黏蛋白mRNA表达 | 第21-22页 |
4 Prrx1过表达对MCF-7细胞迁移能力的影响 | 第22页 |
5 CCK-8检测MCF-7细胞 24h、48h以及转染前后不同三组的IC50 | 第22-24页 |
6 流式细胞术检测Prrx1过表达对MCF-7细胞凋亡率的影响 | 第24-25页 |
7Western blot检测病毒感染后的乳腺癌MCF-7细胞Prrx1、Twist1、ABCB1的表达 | 第25-26页 |
讨论 | 第26-28页 |
结论 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-32页 |
综述 EMT与耐药的相关性研究 | 第32-45页 |
综述参考文献 | 第39-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |