摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表(Abbreviations) | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 研究问题的由来 | 第13页 |
1.2 细胞自噬概述 | 第13-14页 |
1.3 细胞自噬调控的分子机制 | 第14-20页 |
1.3.1 泛素样蛋白系统对细胞自噬的调控 | 第15-16页 |
1.3.2 mTOR信号通路对细胞自噬的调控 | 第16页 |
1.3.3 miRNA对细胞自噬的调控 | 第16-17页 |
1.3.4 lncRNA对细胞自噬的调控 | 第17-20页 |
1.4 lncRNA UCA1研究进展 | 第20-22页 |
1.4.1 UCA1简述 | 第20页 |
1.4.2 UCA1在肿瘤的作用 | 第20-22页 |
1.5 结肠癌简述 | 第22页 |
1.6 研究目的及意义 | 第22-24页 |
2 实验材料 | 第24-28页 |
2.1 引物及核苷酸序列 | 第24-25页 |
2.2 细胞 | 第25页 |
2.3 主要试剂和药品 | 第25-26页 |
2.4 主要培养基和缓冲液 | 第26-27页 |
2.5 主要仪器 | 第27-28页 |
3 实验方法 | 第28-35页 |
3.1 细胞培养 | 第28页 |
3.2 细胞瞬时转染 | 第28页 |
3.3 细胞总RNA提取和反转录 | 第28-29页 |
3.3.1 提取细胞总RNA | 第28-29页 |
3.3.2 反转录 | 第29页 |
3.4 qPCR | 第29-30页 |
3.5 细胞总蛋白提取 | 第30页 |
3.6 BCA法测定蛋白浓度 | 第30-31页 |
3.7 Western Blot | 第31-33页 |
3.7.1 SDS-PAGE电泳 | 第31-32页 |
3.7.2 转膜 | 第32页 |
3.7.3 杂交 | 第32页 |
3.7.4 显影 | 第32-33页 |
3.8 CCK-8 实验 | 第33页 |
3.9 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第33页 |
3.10 流式细胞术检测细胞周期 | 第33-34页 |
3.11 数据统计 | 第34-35页 |
4 结果与分析 | 第35-48页 |
4.1 UCA1对细胞自噬的调控 | 第35-38页 |
4.1.1 UCA1与自噬基因的相关性分析 | 第35-36页 |
4.1.2 UCA1对细胞自噬以及AKT/mTOR信号通路的调控 | 第36-38页 |
4.2 UCA1对miR-23a表达的影响 | 第38-39页 |
4.3 UCA1对LPS刺激下细胞增殖凋亡的影响 | 第39-42页 |
4.3.1 UCA1对细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
4.3.2 UCA1对细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
4.3.3 UCA1对细胞周期的影响 | 第41-42页 |
4.4 UCA1在结肠癌细胞内的表达以及对其细胞自噬的影响 | 第42-44页 |
4.4.1 UCA1在结肠癌细胞内的表达 | 第42-43页 |
4.4.2 UCA1对结肠癌细胞自噬的影响 | 第43-44页 |
4.5 UCA1调控细胞自噬对结肠癌细胞增殖凋亡的影响 | 第44-48页 |
4.5.1 UCA1通过调控细胞自噬影响结肠癌细胞的增殖 | 第44-45页 |
4.5.2 UCA1通过调控细胞自噬促进结肠癌细胞凋亡 | 第45-46页 |
4.5.3 UCA1通过调控细胞自噬影响结肠癌细胞的周期 | 第46-48页 |
5 讨论 | 第48-52页 |
5.1 UCA1对细胞自噬的调控 | 第48-49页 |
5.2 UCA1与miR-23a的互作关系 | 第49-50页 |
5.3 UCA1对结肠癌细胞自噬的影响 | 第50页 |
5.4 UCA1对细胞增殖在凋亡的影响 | 第50-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
附录 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |