解淀粉芽孢杆菌HZ-1510壳聚糖酶基因的克隆、重组表达及其活性研究
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 解淀粉芽孢杆菌的概述 | 第11-12页 |
| 1.2 壳聚糖的概述 | 第12页 |
| 1.3 壳寡糖的概述 | 第12-13页 |
| 1.4 壳寡糖的制备 | 第13-14页 |
| 1.5 壳聚糖酶 | 第14-19页 |
| 1.5.1 壳聚糖酶的发现 | 第14页 |
| 1.5.2 壳聚糖酶的分类 | 第14-15页 |
| 1.5.3 壳聚糖酶的分布来源 | 第15-16页 |
| 1.5.4 壳聚糖酶的基本生化特性 | 第16-18页 |
| 1.5.5 壳聚糖酶的结构研究 | 第18页 |
| 1.5.6 壳聚糖酶活性研究 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 产壳聚糖酶菌株的筛选及鉴定 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 产壳聚糖酶菌株的筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.2 菌种的保藏 | 第21页 |
| 2.2.3 产壳聚糖酶菌株的分子生物学鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 产壳聚糖酶菌株的生理生化鉴定 | 第22-24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-29页 |
| 2.3.1 筛选分离产壳聚糖酶菌株结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 菌株16S rDNA鉴定结果 | 第25-27页 |
| 2.3.3 菌株的生理生化鉴定结果 | 第27页 |
| 2.3.4 菌株gyrA基因鉴定结果 | 第27-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.4.1 产壳聚糖酶菌株的筛选 | 第29页 |
| 2.4.2 产壳聚糖酶菌株的鉴定 | 第29-30页 |
| 第三章 壳聚糖酶基因的克隆及生物信息学分析 | 第30-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 壳聚糖酶基因的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.2 壳聚糖酶基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 3.3 实验结果 | 第33-37页 |
| 3.3.1 壳聚糖酶基因的克隆结果 | 第33-34页 |
| 3.3.2 壳聚糖酶基因的生物信息学分析结果 | 第34-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 壳聚糖酶的重组表达、分离及纯化 | 第39-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要培养基及基本溶液配制 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 4.2.1 壳聚糖酶重组质粒的构建 | 第40-43页 |
| 4.2.2 壳聚糖酶的重组表达 | 第43页 |
| 4.2.3 活性蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 4.2.4 重组壳聚糖酶的分离及纯化 | 第44页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第44-48页 |
| 4.3.1 壳聚糖酶重组质粒的构建结果 | 第44-46页 |
| 4.3.2 壳聚糖酶的重组表达结果 | 第46-47页 |
| 4.3.3 重组壳聚糖酶的分离及纯化结果 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 重组壳聚糖酶活力的研究 | 第50-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 5.1.1 主要仪器设备 | 第50页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 5.1.3 主要溶液的配制 | 第50-51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 5.2.1 壳聚糖酶活力检测 | 第51-52页 |
| 5.2.2 温度对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第52-53页 |
| 5.2.3 pH对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第53页 |
| 5.2.4 金属离子对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第53页 |
| 5.3 实验结果及分析 | 第53-57页 |
| 5.3.1 壳聚糖酶活力检测标准曲线的制作结果 | 第53-54页 |
| 5.3.2 温度对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.3 pH对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.4 金属离子对重组壳聚糖酶活力的影响 | 第56-57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-60页 |
| 全文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 附录 | 第70-78页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
