缩略语 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
前言 | 第12-14页 |
实验一 优选脱细胞制备细胞外基质的方法 | 第14-27页 |
一 目的 | 第14页 |
二 实验材料 | 第14-17页 |
2.1 主要仪器和设备 | 第14-15页 |
2.2 主要材料和试剂 | 第15-16页 |
2.3 主要试剂的配制 | 第16-17页 |
三 实验方法 | 第17-22页 |
3.1 物理法和物理化学法制备人软骨细胞外基质 | 第17-19页 |
3.2 仿生细胞外基质支架的制备 | 第19页 |
3.3 检测方法 | 第19-22页 |
四 结果 | 第22-26页 |
4.1 DNA 定量 | 第22-23页 |
4.2 GAG 定量 | 第23页 |
4.3 细胞增殖反应和细胞毒性的结果 | 第23-25页 |
4.4 羟脯氨酸定量 | 第25-26页 |
五 结论 | 第26页 |
六 讨论 | 第26-27页 |
实验二 物理法制备的人脐带细胞外基质的检测 | 第27-38页 |
一 目的 | 第27页 |
二 实验材料 | 第27-29页 |
三 实验方法 | 第29-33页 |
3.1 主要液体的配制 | 第29-30页 |
3.2 正常人脐带及其 Wharton 胶组织学染色 | 第30-32页 |
3.3 脱细胞人脐带细胞外基质材料的制备 | 第32页 |
3.4 脱细胞人脐带细胞外基质的微观结构 | 第32页 |
3.6 DNA 定量 | 第32-33页 |
3.7 GAG 定量 | 第33页 |
3.8 羟脯氨酸定量 | 第33页 |
五 结果 | 第33-37页 |
5.1 正常脐带组织的化学成分定性 | 第33-35页 |
5.2 物理法制备的人脐带细胞外基质的特点 | 第35-37页 |
六 结论 | 第37-38页 |
实验三 物理法制备人脐带细胞外基质与人软骨细胞外基质比较 | 第38-50页 |
一 目的 | 第38页 |
二 实验方法 | 第38-43页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第38-40页 |
2.2 主要液体的配制 | 第40-41页 |
2.3 样品准备 | 第41页 |
2.4 检测方法 | 第41-43页 |
三 结果 | 第43-49页 |
3.1 hWJECM 和 hACECM 的组织学观察 | 第43-44页 |
3.2 DNA&GAG 羟脯氨酸定量 | 第44-46页 |
3.3 两种 ECM 取向支架的 GAG、羟脯氨酸定量检测 | 第46页 |
3.4 人脐带细胞外基质支架的吸水率 | 第46-47页 |
3.5 人脐带 WJECM 支架的生物力学性能 | 第47-49页 |
四 结论 | 第49-50页 |
实验四 兔软骨细胞分别接种在人脐带细胞外基质和人软骨细胞外基质分别包被的培养板的初步实验研究 | 第50-68页 |
一 目的 | 第50页 |
二 实验材料 | 第50-51页 |
三 实验方法 | 第51-55页 |
3.1 软骨细胞分离、培养和扩增 | 第51-52页 |
3.2 培养软骨细胞的形态观察与传代 | 第52页 |
3.3 软骨细胞的鉴定 | 第52-53页 |
3.4 hWJECM 和 hACECM 的培养板的包被 | 第53页 |
3.5 实验分组 | 第53页 |
3.6 培养方法 | 第53页 |
3.7 光镜观察铺板情况 | 第53页 |
3.8 扫描电镜观察 | 第53-54页 |
3.9 原子力学显微镜: | 第54页 |
3.10 CCK8 细胞增殖的测定 | 第54页 |
3.11 光镜观察和组织学染色 | 第54页 |
3.12 DNA 定量 | 第54页 |
3.13 GAG 定量 | 第54-55页 |
3.14 羟脯氨酸定量 | 第55页 |
四 结果 | 第55-65页 |
4.1 软骨细胞培养倒置显微镜观察 | 第55页 |
4.2 传代软骨细胞倒置显微镜下观察 | 第55页 |
4.3 细胞爬片组织学结果 | 第55-57页 |
4.4 光镜和电镜下观察两种 ECM 的铺膜 | 第57-60页 |
4.5 三个实验组的大体观察及组织学染色、电镜结果分析 | 第60页 |
4.6 DNA、GAG 和羟脯氨酸定量结果分析 | 第60-65页 |
五 结论 | 第65-66页 |
六 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-71页 |
文献综述 | 第71-84页 |
参考文献 | 第77-84页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |