| 目 录 | 第6-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-28页 |
| 一、 支气管哮喘概述 | 第11-12页 |
| 二、 支气管哮喘中IL-4、IL-13的作用 | 第12-16页 |
| 三、 共刺激信号在支气管哮喘中的作用 | 第16-18页 |
| 四、 CTLA4对T细胞的抑制作用 | 第18-21页 |
| 五、 CD4+CD45RO+T细胞与细胞因子 | 第21-26页 |
| 六、 小鼠哮喘动物模型的建立 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料、方法和结果 | 第28-54页 |
| 第一节 共刺激分子CTLA4-Ig对哮喘病人T细胞功能的影响 | 第28-36页 |
| 一、 实验材料 | 第28-31页 |
| (一) 主要试剂 | 第28页 |
| (二) 主要试剂配制 | 第28-30页 |
| (三) 主要器材和设备 | 第30-31页 |
| 二、 研究对象 | 第31页 |
| 三、 步骤和方法 | 第31-33页 |
| 1 、PBMC的分离和培养 | 第31页 |
| 2 、摸索PHA适宜刺激浓度 | 第31-32页 |
| 3 、摸索CTLA4-Ig适宜刺激浓度 | 第32页 |
| 4 、分组刺激 | 第32页 |
| 5 、细胞总RNA提取及逆转录PCR、电泳 | 第32-33页 |
| 6 、分析、统计 | 第33页 |
| 四、 实验结果 | 第33-36页 |
| (一) 实验条件选择 | 第33-34页 |
| 1 、PHA最适刺激浓度 | 第33-34页 |
| 2 、CTLA4-Ig最适刺激浓度 | 第34页 |
| (二) 共刺激分子CTLA4-Ig对哮喘病人T细胞表达IL-13的影响 | 第34-36页 |
| 第二节 共刺激分子CTLA4-Ig对支气管哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞功能的影响 | 第36-46页 |
| 一、 实验材料 | 第36页 |
| (一) 主要试剂 | 第36页 |
| (二) 主要试剂配制 | 第36页 |
| (三) 主要器材和设备 | 第36页 |
| 二、 研究对象 | 第36页 |
| 三、 步骤和方法 | 第36-39页 |
| 1 、外周血单个核细胞的分离 | 第36页 |
| 2 、粘附法去除单核细胞 | 第36-37页 |
| 3 、尼龙棉柱法分离T、B细胞 | 第37页 |
| (1) 尼龙棉柱的制备 | 第37页 |
| (2) 细胞过柱分离 | 第37页 |
| 4 、免疫磁性微珠分离法分离CD4+T细胞 | 第37-38页 |
| 5 、免疫磁性微珠分离法分离CD4+CD45RO+T细胞 | 第38页 |
| 6 、分组刺激 | 第38页 |
| 7 、上清测IL-4、IL-13按试剂盒说明书操作 | 第38-39页 |
| 四、 实验结果 | 第39-46页 |
| 1 、正常对照组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4情况及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第39-40页 |
| 2 、哮喘病人组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4情况及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第40-41页 |
| 3 、正常对照组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-13情况及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第41-42页 |
| 4 、哮喘病人组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-13情况及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第42-43页 |
| 5 、哮喘病人组和正常对照组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4的组间差异及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第43-44页 |
| 6 、哮喘病人组和正常对照组CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-13的组间差异及PHA和CTLA4-Ig的影响 | 第44-45页 |
| 7 、哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞分泌IL-4、IL-13的差异及PHA和CTLA4-Ig对IL-4、IL-13影响的差异 | 第45-46页 |
| 第三节 CTLA4-Ig对过敏性哮喘小鼠气道高反应性和T细胞功能的影响 | 第46-54页 |
| 一、 实验材料 | 第46-47页 |
| (一) 主要试剂 | 第46页 |
| (二) 主要仪器 | 第46-47页 |
| 二、 研究对象 | 第47页 |
| 三、 步骤和方法 | 第47-49页 |
| 1 、哮喘模型的建立 | 第47-48页 |
| 2 、外周血白细胞计数及分类 | 第48页 |
| 3 、支气管肺泡灌洗 | 第48页 |
| 4 、制备肺匀浆 | 第48页 |
| 5 、血清、BALF及肺匀浆中IL-4的测定 | 第48页 |
| 6 、血清、BALF及肺匀浆中IL-13的测定 | 第48页 |
| 7 、气道高反应性的测定 | 第48页 |
| 8 、统计学分析 | 第48-49页 |
| 四、 实验结果 | 第49-54页 |
| 1 、外周血白细胞总数及嗜酸粒细胞比例 | 第49页 |
| 2 、BALF中细胞总数及分类 | 第49-50页 |
| 3 、血清、BALF及肺匀浆上清IL-4水平测定 | 第50-51页 |
| 4 、血清、BALF及肺匀浆上清中IL-13水平测定 | 第51-52页 |
| 5 、CTLA4-Ig对气道高反应性的影响 | 第52-53页 |
| 6 、组织病理学检查 | 第53-54页 |
| 第三章 讨论 | 第54-65页 |
| 第一节 共刺激分子CTLA4-Ig对支气管哮喘病人T细胞功能的影响 | 第54-57页 |
| 第二节 CTLA4-Ig对支气管哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞功能的影响 | 第57-62页 |
| 一、 哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞分泌细胞因子的情况 | 第57-61页 |
| 二、 哮喘病人CD4+CD45RO+T细胞受CTLA4-Ig影响分泌细胞因子的情况 | 第61-62页 |
| 第三节 CTLA4-Ig对过敏性哮喘小鼠气道高反应性和T细胞功能的影响 | 第62-65页 |
| 结 论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 攻读博士学位期间已发表的文章及专著 | 第79-80页 |
| 中文摘要 | 第80-85页 |
| 英文摘要 | 第85页 |
| 致 谢 | 第92-93页 |
