摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 双元系统 | 第11-15页 |
1.1.1 双元系统的结构及其功能 | 第11-12页 |
1.1.2 双元系统的信号转导及传导的特异性 | 第12页 |
1.1.3 Synechocystis PCC6803中的双元信号转导系统 | 第12-15页 |
1.2 毒素-抗毒素系统 | 第15-20页 |
1.2.1 TAS组分 | 第16页 |
1.2.2 TAS活性的调控 | 第16-19页 |
1.2.3 其他细胞因子对TAS组分活性的调控作用 | 第19页 |
1.2.4 Synechocystis PCC6803基因组中的TAS | 第19-20页 |
1.3 酵母双杂交技术验证蛋白的相互作用 | 第20-23页 |
1.3.1 酵母双杂交基本原理 | 第20-22页 |
1.3.2 酵母双杂交表达载体 | 第22-23页 |
1.3.3 诱饵蛋白载体毒性测试及自激活性检测 | 第23页 |
1.4 本实验的研究目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料和方法 | 第25-36页 |
2.1 分子生物学试剂和菌株 | 第25页 |
2.2 培养条件和方法 | 第25页 |
2.3 分子生物学操作方法 | 第25-33页 |
2.3.1 Synechocysiti PCC 6803染色体DNA的提取 | 第25-26页 |
2.3.2 细菌质粒的提取 | 第26-27页 |
2.3.3 PCR反应 | 第27-30页 |
2.3.4 DNA片段的回收 | 第30-31页 |
2.3.5 酶切与连接反应 | 第31页 |
2.3.6 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第31-32页 |
2.3.7 Synechocysiti PCC6803的转化及转化子的筛选 | 第32页 |
2.3.8 酵母感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
2.3.9 酵母细胞和突变株的生长分析 | 第33页 |
2.4 缺失突变株的构建 | 第33-36页 |
第三章 结果和讨论 | 第36-56页 |
3.1 可能相互作用的蛋白基因的克隆 | 第36-40页 |
3.2 酵母表达相互作用的蛋白基因的重组质粒构建 | 第40-42页 |
3.3 表达质粒转化及共转化子筛选 | 第42-47页 |
3.4 阳性酵母共转化子的鉴定 | 第47-51页 |
3.5 突变株DR1552和DR1554胁迫条件下生长特性分析 | 第51-54页 |
3.5.1 缺失突变株的鉴定 | 第51-52页 |
3.5.2 缺失突变株DR1552和DR1554在Cd、Nacl胁迫条件下生长特性. | 第52-54页 |
3.6 讨论 | 第54-56页 |
第四章 总结与展望 | 第56-58页 |
4.1 总结 | 第56页 |
4.2 展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
附表1 基因克隆于pMD-18T中的质粒 | 第68-70页 |
附录A 缩略语 | 第70-71页 |
附录B 主要实验仪器 | 第71-72页 |
附录C 主要试剂及配制 | 第72-73页 |