| 摘要 | 第4-5页 |
| SUMMARY | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 NCG在养猪生产中的应用 | 第13-16页 |
| 1.1 NCG概述 | 第13页 |
| 1.2 NCG在养猪生产中的应用 | 第13-16页 |
| 1.2.1 饲粮中添加NCG对妊娠期母猪生产性能的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.2 饲粮中添加NCG对哺乳期母猪生产性能的影响 | 第14页 |
| 1.2.3 饲粮中添加NCG对哺乳期仔猪生产性能的影响 | 第14-15页 |
| 1.2.4 饲粮中添加NCG对断奶仔猪生产性能的影响 | 第15页 |
| 1.2.5 饲粮中添加NCG对公猪生产性能的影响 | 第15-16页 |
| 1.3 NCG的应用前景 | 第16页 |
| 2 动物初情期形成的理论假设 | 第16-17页 |
| 3 Gn RH的综述 | 第17-23页 |
| 3.1 Gn RH分泌的调节 | 第17-18页 |
| 3.1.1 Gn RH的合成与分布 | 第17页 |
| 3.1.2 Gn RH的分泌与降解 | 第17-18页 |
| 3.2 Gn RH的生理作用 | 第18-22页 |
| 3.2.1 Gn RH对HPG轴的调控及其反馈调控 | 第18-22页 |
| 3.3 Gn RH神经元 | 第22-23页 |
| 4 Gn RH神经元离体模型—GT1-7 细胞 | 第23-29页 |
| 4.1 GT1-7 细胞的来源 | 第23-24页 |
| 4.2 GT1-7 细胞的特性 | 第24-25页 |
| 4.2.1 GT1-7 细胞分泌模式 | 第24页 |
| 4.2.2 时钟基因对GT1-7 细胞分泌的调节 | 第24-25页 |
| 4.2.3 离子通道对GT1-7 细胞分泌的调节 | 第25页 |
| 4.3 GT1-7 细胞在生殖相关研究中的应用 | 第25-29页 |
| 4.3.1 GT1-7 细胞与E_2/ER | 第25-26页 |
| 4.3.2 GT1-7 细胞与Kisspeptin/GPR54 | 第26-27页 |
| 4.3.3 GT1-7 细胞与Leptin | 第27页 |
| 4.3.4 GT1-7 细胞与MLT | 第27-29页 |
| 第二章 实验研究 | 第29-61页 |
| 实验一 日粮中添加NCG对SD大鼠性发育的影响研究 | 第29-35页 |
| 1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 1.1 实验设计 | 第29页 |
| 1.2 实验材料与仪器 | 第29-31页 |
| 1.3 数据统计与分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-32页 |
| 2.1 日粮中添加NCG对SD雌性大鼠初情期及初产繁殖性能的影响 | 第31-32页 |
| 2.2 日粮中添加NCG对SD雌性大鼠第二胎繁殖性能的影响 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 4 小结 | 第34-35页 |
| 实验二 不同水平雌激素对GT1-7 细胞Gn RH分泌及相关基因表达的影响 | 第35-61页 |
| 1 材料 | 第35-37页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第35-36页 |
| 1.2 主要仪器与耗材 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-44页 |
| 2.1 GT1-7 细胞的培养 | 第37-39页 |
| 2.1.1 复苏 | 第37页 |
| 2.1.2 传代 | 第37-38页 |
| 2.1.3 冻存 | 第38-39页 |
| 2.2 GT1-7 细胞总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.1 细胞沉淀的收集 | 第39页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.3 RNA浓度测定 | 第39页 |
| 2.3 逆转录为c DNA | 第39-40页 |
| 2.4 常规PCR扩增 | 第40页 |
| 2.5 PCR产物电泳鉴定 | 第40-41页 |
| 2.6 不同浓度和不同时间E_2处理GT1-7 细胞 | 第41-44页 |
| 2.6.1 E_2溶液的配制 | 第41页 |
| 2.6.2 E_2对GT1-7 细胞的处理 | 第41-42页 |
| 2.6.3 Gn RH浓度的测定 | 第42页 |
| 2.6.4 总RNA提取及逆转录 | 第42页 |
| 2.6.5 实时荧光定量PCR | 第42-44页 |
| 2.7 数据统计与分析 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-56页 |
| 3.1 GT1-7 细胞的形态 | 第44-46页 |
| 3.2 Gn RH标准曲线的制作 | 第46页 |
| 3.3 PCR产物电泳分析 | 第46-47页 |
| 3.4 GT1-7 细胞基因的扩增展曲线和溶解曲线 | 第47-49页 |
| 3.5 不同水平E_2对GT1-7 细胞Gn RH分泌及相关基因表达的影响 | 第49-52页 |
| 3.5.1 不同水平E_2对GT1-7 细胞Gn RH分泌的影响 | 第49-50页 |
| 3.5.2 不同水平E_2对GT1-7 细胞Gn RH分泌相关基因表达的影响 | 第50-52页 |
| 3.6 100p M E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌及相关基因表达的影响 | 第52-54页 |
| 3.6.1 100p M E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌的影响 | 第52-53页 |
| 3.6.2 100p M E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌相关基因表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.7 1μM E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌及相关基因表达的影响 | 第54-56页 |
| 3.7.1 1μM E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌的影响 | 第54-55页 |
| 3.7.2 1μM E_2处理GT1-7 细胞对Gn RH分泌相关基因表达的影响 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| 5 小结 | 第60-61页 |
| 第三章 结论 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 1. GT1-7 细胞总RNA的提取 | 第62-63页 |
| 2. GT1-7 细胞Gn RH浓度测定 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
