| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 引言 | 第14-25页 |
| 1.1 人羊膜间充质干细胞研究现状 | 第14-20页 |
| 1.1.1 人羊膜间充质干细胞的分离培养 | 第14-16页 |
| 1.1.2 人羊膜间充质干细胞形态和免疫表型 | 第16页 |
| 1.1.3 人羊膜间充质干细胞体外诱导分化体系 | 第16-18页 |
| 1.1.4 人羊膜间充质干细胞体内诱导分化体系 | 第18页 |
| 1.1.5 人羊膜间充质干细胞免疫原性及免疫调控功能 | 第18-20页 |
| 1.2 干细胞治疗肝脏疾病研究进展 | 第20-23页 |
| 1.2.1 四氯化碳与肝损伤 | 第20页 |
| 1.2.2 干细胞治疗肝脏疾病研究现状 | 第20-21页 |
| 1.2.3 肝损伤修复机理的研究 | 第21-22页 |
| 1.2.4 移植细胞动物实验是否可归巢到损伤肝脏 | 第22页 |
| 1.2.5 间充质干细胞对肝损伤动物模型疗效评估 | 第22-23页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.4 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 实验一 人羊膜间充质干细胞体外分离培养及诱导分化 | 第25-48页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2 实验结果 | 第30-45页 |
| 2.2.1 不同浓度Ⅰ型胶原酶消化分离人羊膜间充质干细胞形态比较 | 第30-32页 |
| 2.2.2 比较不同冻存液对人羊膜间充质干细胞复苏效果 | 第32-33页 |
| 2.2.3 人羊膜间充质干细胞的生长曲线 | 第33-34页 |
| 2.2.4 人羊膜间充质干细胞染色体数目分析 | 第34-35页 |
| 2.2.5 流式细胞仪检测标记抗原 | 第35-37页 |
| 2.2.6 免疫细胞化学染色 | 第37-38页 |
| 2.2.7 免疫荧光检测表面标记蛋白 | 第38-39页 |
| 2.2.8 向脂肪细胞诱导分化及鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.9 向成骨细胞诱导分化鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.10 向神经细胞诱导分化鉴定 | 第41-43页 |
| 2.2.11 向胰岛样细胞诱导分化鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.12 RT-PCR检测hAMSCs诱导后细胞 | 第44-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 2.4 小结 | 第47-48页 |
| 3 实验二 人羊膜间充质干细胞定位修复小鼠肝损伤模型 | 第48-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-52页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第48-49页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第49页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第49-52页 |
| 3.2 实验结果 | 第52-59页 |
| 3.2.1 移植人羊膜间充质干细胞在小鼠肝脏体内示踪(活体成像) | 第52-54页 |
| 3.2.2 CFSE标记人羊膜间充质干细胞结果 | 第54页 |
| 3.2.3 小鼠肝损伤模型的建立 | 第54-55页 |
| 3.2.4 比较hAMSCs移植前后小鼠肝组织病理学变化 | 第55-56页 |
| 3.2.5 hAMSCs移植前后小鼠肝功能变化 | 第56-58页 |
| 3.2.6 CFSE标记的hAMSCs的肝内分布定植 | 第58-59页 |
| 3.2.7 免疫荧光检测细胞移植后小鼠肝Alb的表达 | 第59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 4 实验三 人羊膜间充质干细胞移植促进肝损伤修复的作用与机制 | 第62-76页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-67页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第62页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第62-63页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第63-67页 |
| 4.2 实验结果 | 第67-73页 |
| 4.2.1 RT-PCR检测HGF、SIRT-1、α-SMA、P~(27kip1)mRNA表达 | 第67-68页 |
| 4.2.2 RT-qPCR产物特异性检测 | 第68-71页 |
| 4.2.3 RT-qPCR检测相对定量结果 | 第71-72页 |
| 4.2.4 Western blot检测 | 第72-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-75页 |
| 4.4 小结 | 第75-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 作者简介 | 第88页 |
