| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语说明 | 第13-15页 |
| 绪论 | 第15-20页 |
| 第一部分 镁降解微环境引起破骨细胞代谢应答和作用机制 | 第20-49页 |
| 1.1 前言 | 第20-21页 |
| 1.2 材料 | 第21-23页 |
| 1.2.1 主要试剂和仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.2.2 动物来源 | 第22页 |
| 1.2.3 重要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 1.3 方法 | 第23-35页 |
| 1.3.1 骨髓单核/巨噬细胞的分离与培养 | 第23-24页 |
| 1.3.2 细胞增殖活性检测 | 第24页 |
| 1.3.3 细胞凋亡活性检测 | 第24-25页 |
| 1.3.4 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟破骨细胞 | 第25-26页 |
| 1.3.5 破骨细胞F-actin环完整性检测 | 第26-27页 |
| 1.3.6 破骨细胞骨吸收研究 | 第27页 |
| 1.3.7 钛颗粒诱导小鼠颅骨骨溶解 | 第27-28页 |
| 1.3.8 Micro-CT分析 | 第28页 |
| 1.3.9 组织学染色 | 第28页 |
| 1.3.10 骨组织形态学计量 | 第28页 |
| 1.3.11 器官培养 | 第28-29页 |
| 1.3.12 实时定量PCR检测 | 第29-31页 |
| 1.3.13 Western Blot | 第31-34页 |
| 1.3.14 荧光素酶报告基因实验（Luciferase assay） | 第34页 |
| 1.3.15 NF-κB亚基p65蛋白核转位检测 | 第34-35页 |
| 1.3.16 数据统计分析 | 第35页 |
| 1.4 结果 | 第35-46页 |
| 1.4.1 镁浸提液细胞毒性分析 | 第35-37页 |
| 1.4.2 镁浸提液影响破骨细胞分化 | 第37-38页 |
| 1.4.3 镁浸提液影响破骨细胞骨吸收功能 | 第38-39页 |
| 1.4.4 镁浸提液能有效抑制磨损钛颗粒介导的小鼠颅骨骨溶解 | 第39-41页 |
| 1.4.5 镁浸提液能有效抑制磨损钛颗粒介导的炎症反应 | 第41-42页 |
| 1.4.6 镁浸提液通过抑制RANKL介导的NF-kB和NFATc1信号通路抑制破骨细胞分化 | 第42-44页 |
| 1.4.7 镁浸提液抑制破骨细胞特异性基因表达 | 第44-45页 |
| 1.4.8 镁浸提液通过抑制NFATc1通路抑制破骨细胞分化和功能 | 第45-46页 |
| 1.5 讨论 | 第46-48页 |
| 1.6 结论 | 第48-49页 |
| 第二部分 镁降解微环境引起成骨细胞代谢应答和作用机制 | 第49-79页 |
| 2.1 引言 | 第49-50页 |
| 2.2 材料 | 第50-54页 |
| 2.2.1 主要试剂和仪器设备 | 第50-52页 |
| 2.2.2 动物和人间充质干细胞来源 | 第52-53页 |
| 2.2.3 重要试剂的配制 | 第53-54页 |
| 2.3 方法 | 第54-64页 |
| 2.3.1 大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养 | 第54页 |
| 2.3.2 人骨髓间充质干细胞（hBMSC）的分离与培养 | 第54页 |
| 2.3.3 细胞增殖活性检测 | 第54-55页 |
| 2.3.4 细胞凋亡活性检测 | 第55-56页 |
| 2.3.5 hBMSC集落生长试验 | 第56页 |
| 2.3.6 hBMSC碱性磷酸酶染色 | 第56-57页 |
| 2.3.7 hBMSC碱性磷酸酶活性定量检测（对硝基苯磷酸钠盐水解反应，pNPP） | 第57页 |
| 2.3.8 hBMSC茜素红染色及半定量分析 | 第57-58页 |
| 2.3.9 hBMSC细胞骨架铺展 | 第58页 |
| 2.3.10 hBMSC细胞粘附实验 | 第58页 |
| 2.3.11 实时定量PCR检测 | 第58-60页 |
| 2.3.12 Western Blot | 第60-64页 |
| 2.3.13 SMAD1蛋白核转位检测 | 第64页 |
| 2.3.14 数据统计分析 | 第64页 |
| 2.4 结果 | 第64-75页 |
| 2.4.1 镁浸提液离子浓度和PH校正值 | 第64页 |
| 2.4.2 镁浸提液对hBMSC细胞毒性分析 | 第64-66页 |
| 2.4.3 镁浸提液对hBMSC成骨分化活性的检测 | 第66-67页 |
| 2.4.4 镁浸提液对hBMSC细胞骨架和细胞铺展的影响 | 第67-69页 |
| 2.4.5 镁浸提液对hBMSC细胞粘附的影响 | 第69-70页 |
| 2.4.6 镁浸提液促进hBMSC钛板骨整合能力 | 第70-71页 |
| 2.4.7 镁浸提液促进hBMSC细胞表面粘附分子表达 | 第71-72页 |
| 2.4.8 镁浸提液促进hBMSC细胞R-SMADs和SMAD4蛋白表达 | 第72-73页 |
| 2.4.9 镁浸提液促进hBMSC细胞R-SMADs和SMAD4复合体核转位 | 第73-74页 |
| 2.4.10 镁浸提液调控hBMSC模式图 | 第74-75页 |
| 2.5 讨论 | 第75-77页 |
| 2.6 结论 | 第77-79页 |
| 第三部分 镁降解微环境抗菌作用的实验研究 | 第79-90页 |
| 3.1 引言 | 第79页 |
| 3.2 材料和方法 | 第79-83页 |
| 3.2.1 主要试剂和仪器设备 | 第79-81页 |
| 3.2.2 镁片和钛片准备 | 第81页 |
| 3.2.3 细菌获得与培养 | 第81页 |
| 3.2.4 细菌生长状态观察 | 第81页 |
| 3.2.5 细菌生物膜活力影响观察 | 第81页 |
| 3.2.6 细菌生物膜生长形态观察 | 第81-82页 |
| 3.2.7 细菌生物膜生长数量 | 第82页 |
| 3.2.8 细菌生物膜相关毒力基因icaA表达分析 | 第82页 |
| 3.2.9 建立SD大鼠骨髓炎模型 | 第82-83页 |
| 3.2.10 SD大鼠骨髓炎观察指标 | 第83页 |
| 3.2.11 数据统计分析 | 第83页 |
| 3.3 结果 | 第83-87页 |
| 3.3.1 镁抑制细菌生长 | 第83页 |
| 3.3.2 镁抑制细菌粘附和生物膜形成 | 第83-84页 |
| 3.3.3 镁表面细菌生物膜毒力基因icaA表达分析 | 第84-85页 |
| 3.3.4 SD大鼠骨髓炎病程进展和微生物分析 | 第85-87页 |
| 3.4 讨论 | 第87-89页 |
| 3.5 结论 | 第89-90页 |
| 第四部分 穿心莲内酯调控骨代谢的实验研究 | 第90-111页 |
| 4.1 引言 | 第90-92页 |
| 4.2 材料 | 第92-94页 |
| 4.2.1 主要试剂和仪器设备 | 第92-93页 |
| 4.2.2 动物来源 | 第93页 |
| 4.2.3 重要试剂的配制 | 第93-94页 |
| 4.3 方法 | 第94-98页 |
| 4.3.1 破骨细胞体外培养体系 | 第94-95页 |
| 4.3.2 穿心莲内酯细胞毒性检测 | 第95页 |
| 4.3.3 破骨细胞骨吸收研究 | 第95页 |
| 4.3.4 实时定量PCR检测破骨细胞特异性基因的表达 | 第95-96页 |
| 4.3.5 Western Blot | 第96-97页 |
| 4.3.6 荧光素酶报告基因实验（Luciferase assay） | 第97页 |
| 4.3.7 NF-κB亚基p65蛋白核转位检测 | 第97页 |
| 4.3.8 动物体内试验 | 第97-98页 |
| 4.3.9 成骨细胞增殖和分化研究 | 第98页 |
| 4.3.10 数据统计分析 | 第98页 |
| 4.4 结果 | 第98-107页 |
| 4.4.1 穿心莲内酯体外抑制破骨细胞分化和骨吸收功能 | 第98-100页 |
| 4.4.2 穿心莲内酯抑制破骨细胞特异性基因的表达 | 第100-101页 |
| 4.4.3 穿心莲内酯抑制NF-kB和ERK信号通路 | 第101-103页 |
| 4.4.4 穿心莲内酯抑制炎症性骨溶解 | 第103-106页 |
| 4.4.5 穿心莲内酯促进成骨细胞分化 | 第106-107页 |
| 4.5 讨论 | 第107-110页 |
| 4.6 结论 | 第110-111页 |
| 全文总结 | 第111-113页 |
| 工作展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-131页 |
| 致谢 | 第131-134页 |
| 博士期间发表论文和其它相关成果 | 第134-139页 |
