摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第12-28页 |
1.1 手足口病 | 第12页 |
1.2 肠道病毒71型 | 第12-13页 |
1.3 EV71病毒的结构 | 第13-16页 |
1.4 EV71病毒基因分型 | 第16页 |
1.5 EV71病毒的复制 | 第16-17页 |
1.6 EV71病毒和天然免疫 | 第17-21页 |
1.7 泛素化修饰调控RIG-I抗病毒信号通路 | 第21-26页 |
1.8 研究的意义与目的 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-38页 |
2.1 材料 | 第28-30页 |
2.1.1 细胞与病毒 | 第28页 |
2.1.2 主要仪器和耗材 | 第28-29页 |
2.1.3 抗体和试剂 | 第29页 |
2.1.4 引物 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-38页 |
2.2.1 病毒的纯化 | 第30页 |
2.2.2 病毒滴度的测定(TCID50) | 第30-31页 |
2.2.3 免疫荧光检测(IFM) | 第31页 |
2.2.4 质粒DNA的提取 | 第31-32页 |
2.2.5 瞬时转染 | 第32页 |
2.2.6 RNA的提取 | 第32-33页 |
2.2.7 RT-PCR及PCR检测 | 第33-35页 |
2.2.8 双荧光素酶报告基因的检测 | 第35-36页 |
2.2.9 Western blot实验 | 第36页 |
2.2.10 免疫共沉淀实验 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-50页 |
3.1 EV71感染抑制宿主IFN-β 信号通路的激活 | 第38-42页 |
3.1.1 EV71感染对细胞形态学的影响 | 第38-39页 |
3.1.2 EV71感染对IFN-β 蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
3.1.3 EV71感染对IFN-β 转录水平的影响 | 第40-41页 |
3.1.4 EV71对IRF3在细胞内定位的影响 | 第41-42页 |
3.2 EV71感染下调ISGs的表达量 | 第42-44页 |
3.3 EV71病毒抑制RIG-I的泛素化 | 第44-46页 |
3.3.1 EV71病毒抑制内源性RIG-I的泛素化 | 第44-45页 |
3.3.2 EV71病毒抑制过表达的RIG-I的泛素化 | 第45-46页 |
3.4 EV71病毒抑制RIG-I的K63位泛素化 | 第46-48页 |
3.5 上调RIG-I的泛素化水平对IFN-β 和ISGs表达的影响 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 EV71抑制RIG-I泛素化模式图 | 第50-51页 |
4.2 EV71抑制泛素化分析 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67-70页 |
个人简历 | 第70页 |