| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 真核细胞分泌蛋白质的运输 | 第10-11页 |
| 1.1.1 分泌蛋白质的合成 | 第10页 |
| 1.1.2 蛋白质分泌途径 | 第10-11页 |
| 1.2 COPII小泡内衣被组分SEC24 | 第11-13页 |
| 1.3 蛋白质精氨酸甲基转移酶 | 第13页 |
| 1.4 精氨酸甲基转移酶的分类 | 第13-14页 |
| 1.5 精氨酸甲基转移酶的底物 | 第14-15页 |
| 1.6 精氨酸甲基转移酶的功能 | 第15-16页 |
| 1.6.1 精氨酸甲基转移酶参与基因转录调控 | 第15页 |
| 1.6.2 精氨酸甲基转移酶参与RNA代谢 | 第15-16页 |
| 1.6.3 精氨酸甲基转移酶参与DNA修复 | 第16页 |
| 1.7 I型精氨酸甲基转移酶PRMT4 | 第16-17页 |
| 1.8 ITRAQ技术 | 第17页 |
| 1.9 研究内容、目的与意义 | 第17-19页 |
| 第2章 材料和方法 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 数据库和生物软件 | 第19页 |
| 2.1.3 实验主要引物序列 | 第19-20页 |
| 2.1.4 本实验所用到的抗体 | 第20页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.6 主要试剂和试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.2 主要培养基及试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.2.1 主要培养基的配制 | 第21页 |
| 2.2.2 DNA提取主要试剂的配制 | 第21页 |
| 2.2.3 蛋白质提取主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE凝胶蛋白质电泳常用试剂 | 第22页 |
| 2.2.5 质谱样品处理使用试剂 | 第22页 |
| 2.2.6 反相色谱使用试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.7 液泡提取主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.2.8 Western blotting主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.3.1 拟南芥培育 | 第23-24页 |
| 2.3.2 DNA提取 | 第24页 |
| 2.3.3 拟南芥总蛋白的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.4 总蛋白ITRAQ多重标记 | 第25-26页 |
| 2.3.5 纳升级反相色谱分级与Triple TOFTM 5600质谱鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.6 eggNOG的功能分类、GO功能注释和KEGG通路分析 | 第27页 |
| 2.3.7 拟南芥液泡的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.7.1 原生质体提取 | 第27页 |
| 2.3.7.2 液泡浓缩 | 第27-28页 |
| 2.3.8 Western blotting检测提取液泡的纯度 | 第28页 |
| 2.3.9 胶内酶解蛋白的质谱鉴定 | 第28-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-59页 |
| 3.1 突变株基因型的鉴定 | 第30-34页 |
| 3.1.1 Atprmt4a-2、Atprmt4b-1单突变株，Atprmt4a-2/4b-1（Atprmt4a4b）双突变株的基因型鉴定 | 第30-32页 |
| 3.1.2 sec24a单碱基突变株的鉴定 | 第32-34页 |
| 3.2 突变株ITRAQ蛋白质组学结果 | 第34-36页 |
| 3.2.1 野生型植株和突变株中总蛋白质的提取 | 第34-35页 |
| 3.2.2 ITRAQ蛋白质组学结果 | 第35-36页 |
| 3.3 AtPRMT4突变对细胞中蛋白质的影响 | 第36-45页 |
| 3.3.1 Atprmt4b-1差异蛋白的GO分析 | 第36-38页 |
| 3.3.2 Atprmt4b-1差异蛋白KEGG Pathway分析 | 第38-40页 |
| 3.3.3 Atprmt4a4b差异蛋白的GO分析 | 第40-42页 |
| 3.3.4 Atprmt4a4b差异蛋白KEGG Pathway分析 | 第42-45页 |
| 3.4 COPII小泡衣被蛋白SEC24A突变对细胞中蛋白质的影响 | 第45-49页 |
| 3.4.1 sec24a单碱基突变株差异蛋白GO分析 | 第45-47页 |
| 3.4.2 sec24a差异蛋白KEGG Pathway分析 | 第47-49页 |
| 3.5 突变株对液泡蛋白质运输的影响 | 第49-59页 |
| 3.5.1 突变株液泡的提取结果 | 第49-51页 |
| 3.5.2 液泡富集程度及纯度的检测 | 第51-52页 |
| 3.5.3 突变株中液泡蛋白的质谱结果 | 第52-56页 |
| 3.5.4 Atprmt4a4b双突变株中缺失蛋白的分子功能和参与的生物过程分析 | 第56-57页 |
| 3.5.5 sec24a单碱基突变株中缺失蛋白的分子功能和参与的生物过程分析 | 第57-59页 |
| 第4章 讨论 | 第59-64页 |
| 第5章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
