| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 文献回顾 | 第18-35页 |
| 实验一 材料合成 | 第35-42页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| 1.1 仪器 | 第35-36页 |
| 1.2 试剂 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-38页 |
| 2.1 试剂除水 | 第36页 |
| 2.2 化合物 4（CHOL-AA-Cit）的合成 | 第36-38页 |
| 2.2.1 化合物1的合成 | 第37页 |
| 2.2.2 化合物2的合成 | 第37页 |
| 2.2.3 化合物2的氨基脱保护反应 | 第37页 |
| 2.2.4 化合物4的合成 | 第37-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-41页 |
| 3.1 化合物3的表征 | 第38-39页 |
| 3.2 化合物4的表征 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 实验二 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的制备及其表征 | 第42-51页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| 1.1 仪器 | 第42页 |
| 1.2 试剂 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-45页 |
| 2.1 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的制备 | 第43-44页 |
| 2.2 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的处方筛选 | 第44页 |
| 2.3 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的表征 | 第44页 |
| 2.4 空白磷酸钙脂质混合纳米粒的稳定性 | 第44页 |
| 2.5 环境pH对LNPS@siBcl-2 和NLNPS@siBcl-2 粒径及zeta电位的影响 | 第44-45页 |
| 2.6 LNPS@siBcl-2 对红细胞膜的破坏作用 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-49页 |
| 3.1 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的处方优化 | 第45-46页 |
| 3.2 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的表征 | 第46-47页 |
| 3.3 空白磷酸钙脂质混合纳米粒的稳定性 | 第47页 |
| 3.4 环境pH对LNPS@siBcl-2 和NLNPS@siBcl-2 粒径及zeta电位的影响 | 第47-49页 |
| 3.5 LNPS@siBcl-2 对红细胞膜的破坏作用 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 实验三 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的体外转染活性和细胞摄取 | 第51-85页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| 1.1 仪器 | 第51页 |
| 1.2 试剂 | 第51-52页 |
| 1.3 细胞 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-60页 |
| 2.1 细胞培养 | 第52页 |
| 2.2 空白磷酸钙脂质混合纳米粒的细胞毒性 | 第52-53页 |
| 2.3 siBcl-2 碱基对序列活性筛选 | 第53页 |
| 2.4 LNPS@siBcl-2 的体外转染活性 | 第53-54页 |
| 2.5 Caspase-3 试剂盒检测LNPS@siBcl-2 对肿瘤细胞凋亡的诱导作用 | 第54-55页 |
| 2.5.1 细胞转染 | 第54页 |
| 2.5.2 蛋白提取和试剂盒检测 | 第54-55页 |
| 2.6 Western Blot验证转染效果 | 第55-56页 |
| 2.6.1 细胞转染 | 第55页 |
| 2.6.2 蛋白提取和蛋白样品的制备 | 第55页 |
| 2.6.3 浓缩胶和分离胶的配制 | 第55页 |
| 2.6.4 电泳缓冲液和转膜缓冲液的配制 | 第55-56页 |
| 2.6.5 Western Blot检测蛋白表达 | 第56页 |
| 2.7 A549细胞对LNPS@Cy5-siBcl-2 的摄取 | 第56-58页 |
| 2.7.1 流式细胞术检测A549细胞对LNPS@Cy5-siBcl-2 的摄取 | 第56-57页 |
| 2.7.2 激光共聚焦显微镜观察A549细胞对LNPS@Cy5-siBcl-2 的摄取 | 第57-58页 |
| 2.8 A549细胞摄取LNPS@Cy5-siBcl-2 的机制 | 第58-59页 |
| 2.8.1 流式细胞术方法检测A549细胞摄取LNPS@Cy5-siBcl-2 的机制 | 第58-59页 |
| 2.8.2 激光共聚焦显微镜检测A549细胞摄取LNPS@Cy5-siBcl-2 的机制 | 第59页 |
| 2.9 LNPS@Cy5-siBcl-2 和NLNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在A549细胞内的动态分布 | 第59-60页 |
| 2.10 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在A549细胞球中的分布 | 第60页 |
| 3 实验结果 | 第60-81页 |
| 3.1 空白磷酸钙脂质混合纳米粒的细胞毒性 | 第60-61页 |
| 3.2 siBcl-2 碱基对序列活性筛选 | 第61-62页 |
| 3.3 LNPS@siBcl-2 的体外转染活性 | 第62-63页 |
| 3.4 Caspase-3 试剂盒检测LNPS@siBcl-2 对A549细胞凋亡的诱导作用 | 第63-64页 |
| 3.5 Western Blot验证转染效果 | 第64-65页 |
| 3.6 A549细胞对LNPS@Cy5-siBcl-2 的摄取 | 第65-73页 |
| 3.7 A549细胞摄取LNPS@Cy5-siBcl-2 的机制 | 第73-77页 |
| 3.7.1 流式细胞术检测低温（4℃）和ATP消耗剂对A549细胞摄取LNPS@Cy5-siBcl-2的影响 | 第73-75页 |
| 3.7.2 激光共聚焦显微镜检测结果 | 第75-77页 |
| 3.8 LNPS@Cy5-siBcl-2 和NLNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在A549细胞内的动态分布 | 第77-80页 |
| 3.9 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在A549细胞球中的分布 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| 实验四 负载siBcl-2 磷酸钙脂质混合纳米粒的体内抗肿瘤活性 | 第85-95页 |
| 1 材料 | 第85-86页 |
| 1.1 仪器 | 第85页 |
| 1.2 试剂 | 第85-86页 |
| 1.3 细胞和动物 | 第86页 |
| 2 实验方法 | 第86-87页 |
| 2.1 LNPS@siBcl-2 的体内抗肿瘤活性 | 第86页 |
| 2.2 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在荷瘤裸鼠主要脏器及肿瘤组织的分布 | 第86-87页 |
| 2.3 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在各器官组织切片的分布 | 第87页 |
| 2.4 苏木精-伊红染色（H&E染色）观察组织形态变化 | 第87页 |
| 2.5 Western Blot检测体内转染活性 | 第87页 |
| 3 实验结果 | 第87-93页 |
| 3.1 LNPS@siBcl-2 的体内抗肿瘤活性 | 第87-88页 |
| 3.2 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在荷瘤裸鼠主要脏器及肿瘤组织的分布 | 第88-90页 |
| 3.3 LNPS@Cy5-siBcl-2 转运Cy5-siBcl-2 在各器官组织切片中的分布 | 第90-92页 |
| 3.4 H&E染色观察组织形态变化 | 第92页 |
| 3.5 Western Blot检测肿瘤组织调亡相关蛋白表达 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 个人简历和研究成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
