摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 棉花耐盐性研究概况 | 第12-13页 |
1.1.1 盐胁迫对棉花影响的范围 | 第12页 |
1.1.2 盐胁迫对棉花生长的影响 | 第12页 |
1.1.3 盐胁迫制约棉花生长发育的机制 | 第12-13页 |
1.2 SPO11-3 基因的研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 SPO11-3 基因结构 | 第13-14页 |
1.2.2 SPO11-3 基因的生物学功能 | 第14-16页 |
1.2.3 SPO11-3 基因可能的的胁迫应答机理 | 第16-17页 |
1.3 核内复制 | 第17-19页 |
1.3.1 核内复制的研究进展 | 第17-18页 |
1.3.2 核内复制与植物抗逆性 | 第18-19页 |
1.4 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)分子机制及应用现状 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
2 GhSPO11-3 基因的分子克隆与鉴定 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株、质粒和载体 | 第21页 |
2.1.3 溶液配制 | 第21-22页 |
2.1.4 常用试剂及酶 | 第22页 |
2.1.5 引物及测序 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 棉花基因组DNA的提取及检测 | 第23页 |
2.2.2 克隆棉花GhSPO11-3 基因 | 第23-26页 |
2.2.3 GhSPO11-3 氨基酸同源序列比对分析以及进化树的构建 | 第26页 |
2.2.4 棉花不同组织RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
2.2.5 GhSPO11-3 基因的组织特征表达分析 | 第27-28页 |
2.2.6 GhSPO11-3 蛋白的亚细胞定位 | 第28-29页 |
2.3 结果分析 | 第29-34页 |
2.3.1 棉花GhSPO11-3 基因的克隆 | 第29-30页 |
2.3.2 GhSPO11-3 蛋白同源序列比对分析 | 第30-31页 |
2.3.3 GhSPO11-3 的氨基酸序列进化树的构建 | 第31-32页 |
2.3.4 棉花GhSPO11-3 基因的组织表达特征分析 | 第32-33页 |
2.3.5 棉花GhSPO11-3 蛋白的亚细胞定位 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-36页 |
3 农杆菌介导的VIGS沉默GhSPO11-3 基因 | 第36-46页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 植物材料 | 第36页 |
3.1.2 菌株、质粒 | 第36页 |
3.1.3 常用试剂及酶 | 第36页 |
3.1.4 抗生素,培养基以及重悬液的配制 | 第36-37页 |
3.2 实验方法 | 第37-40页 |
3.2.1 含有目的基因片段的沉默载体TRV:SPO11-3 构建 | 第37-38页 |
3.2.2 棉花VIGS体系的构建 | 第38页 |
3.2.3 转化植株GhSPO11-3 基因表达水平的检测 | 第38-39页 |
3.2.4 转化植株的倍性分析 | 第39页 |
3.2.5 转化植株的细胞学分析 | 第39-40页 |
3.3 结果分析 | 第40-44页 |
3.3.1 病毒诱导基因沉默载体的构建 | 第40-41页 |
3.3.2 棉花GhSPO11-3 基因沉默植株的获得 | 第41页 |
3.3.3 棉花GhSPO11-3 基因沉默植株表型分析 | 第41-42页 |
3.3.4 目标基因表达水平的检测 | 第42-43页 |
3.3.5 流式细胞仪分析 | 第43-44页 |
3.3.6 细胞学分析 | 第44页 |
3.4 讨论 | 第44-46页 |
4 沉默GhSPO11-3 基因的陆地棉耐盐性分析 | 第46-53页 |
4.1 材料 | 第46页 |
4.1.1 植物材料 | 第46页 |
4.1.2 常用试剂 | 第46页 |
4.2 实验方法 | 第46-48页 |
4.2.1 沉默GhSPO11-3 基因的陆地棉盐胁迫处理 | 第46页 |
4.2.2 棉花叶片中叶绿素含量的测定 | 第46-47页 |
4.2.3 棉花叶片中脯氨酸含量的测定 | 第47页 |
4.2.4 棉花叶片中丙二醛含量的测定 | 第47-48页 |
4.2.5 耐盐相关基因的表达量分析 | 第48页 |
4.3 结果分析 | 第48-51页 |
4.3.1 盐胁迫对GhSPO11-3 基因沉默的棉花表型的影响 | 第48-49页 |
4.3.2 盐胁迫对棉花叶绿素含量的影响 | 第49页 |
4.3.3 盐胁迫对棉花脯氨酸含量的影响 | 第49页 |
4.3.4 盐胁迫对棉花丙二醛含量的影响 | 第49-50页 |
4.3.5 盐胁迫对胁迫响应基因表达量的影响 | 第50-51页 |
4.4 讨论 | 第51-53页 |
5 结论与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录一 本试验所用引物列表 | 第61-62页 |
附录二 实验所用主要仪器 | 第62-63页 |
个人简历 | 第63页 |
硕士期间发表论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |