论文目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略词 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
一、RSK蛋白家族概述 | 第9-13页 |
1、RSKs基本特征 | 第9页 |
2、RSKs在肿瘤发生中与类固醇激素信号肽的关系 | 第9-10页 |
3、RSKs在激素相关的肿瘤发生中发挥作用 | 第10-13页 |
4、RSK1-4 异同 | 第13页 |
二、X染色体连锁基因与癌症 | 第13-14页 |
三、RSK4研究现状 | 第14-18页 |
1、基本特征 | 第14页 |
2、RSK4在人体内的分布 | 第14页 |
3、人RSK4蛋白功能描述 | 第14-18页 |
四、胶质瘤的研究现状 | 第18-21页 |
1、发病机制 | 第18-20页 |
2、药物治疗研究进展 | 第20-21页 |
第二章 人RSK4基因真核表达载体的构建表达 | 第21-51页 |
一、实验材料 | 第21-22页 |
1、菌种、克隆表达载体 | 第21页 |
2、实验试剂 | 第21页 |
3、实验仪器 | 第21-22页 |
二、实验方法 | 第22-43页 |
1、MCF-10A细胞的培养 | 第22-23页 |
2、MCF-10A细胞总RNA的提取 | 第23页 |
3、总 RNA 电泳检测 | 第23-24页 |
4、RT-PCR 扩增人 RSK4基因编码区 | 第24-26页 |
5、基因片段的 TA 克隆 | 第26-29页 |
6、人RSK4真核表达载体pcDNA3.1(-)/RSK4的构建 | 第29页 |
7、真核表达载体 pcDNA3.1(-)/RSK4的瞬时转染 | 第29-32页 |
8、RT-PCR 检测真核表达载体 mRNA 水平的表达 | 第32页 |
9、Western blot 检测 RSK4蛋白质的表达 | 第32-36页 |
10、免疫亲和层析柱法纯化RSK4蛋白 | 第36-37页 |
11、RSK4基因对胶质瘤细胞U87增殖抑制作用研究 | 第37-43页 |
三、结果 | 第43-49页 |
1、PCR产物的TA克隆及酶切鉴定 | 第43页 |
2、真核表达载体pcDNA3.1(-)/RSK4 的构建与鉴定 | 第43页 |
3、RSK4在U87细胞中的表达 | 第43-46页 |
4、免疫亲和层析柱法纯化 RSK4 蛋白 | 第46-47页 |
5、RSK4对U87细胞的增殖抑制 | 第47-48页 |
6、讨论 | 第48-49页 |
四、结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61页 |