| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 1. 研究背景 | 第12页 |
| 2. 研究现状 | 第12-15页 |
| 2.1 细胞重编程 | 第12页 |
| 2.2 Wnt信号通路与体细胞重编程 | 第12-13页 |
| 2.3 成体干细胞标记物LGR5 | 第13页 |
| 2.4 LGR5和RSPO3 | 第13-15页 |
| 材料和方法 | 第15-34页 |
| 1.材料 | 第15-20页 |
| 1.1 实验动物 | 第15页 |
| 1.2 实验细胞 | 第15页 |
| 1.3 实验质粒 | 第15-16页 |
| 1.4 实验试剂与培养基 | 第16-18页 |
| 1.5 实验耗材与仪器 | 第18-20页 |
| 2.方法 | 第20-34页 |
| 2.1 实验细胞获取 | 第20-21页 |
| 2.2 iPSC多能性鉴定-碱性磷酸酶染色 | 第21页 |
| 2.3 检测基因表达情况和定位 | 第21-25页 |
| 2.4 基因表达载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.5.病毒组装与感染 | 第29-30页 |
| 2.6 蛋白与DNA相互作用检测-染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第30-31页 |
| 2.7 ES细胞系的建立和分化 | 第31-32页 |
| 2.8 ES细胞的EB分化实验 | 第32-34页 |
| 结果 | 第34-47页 |
| 1.基因Lgr5和Rspo3的表达情况 | 第34-36页 |
| 2.基因过表达载体构建 | 第36页 |
| 3.Rspo3在小鼠胚胎成纤维细胞中过表达影响细胞增殖 | 第36-38页 |
| 4.Lgr5/Lgr4/Rspo3在体细胞重编程中作用探究 | 第38-40页 |
| 5.Lgr5和Rspo3过表达对小鼠胚胎干细胞的作用和影响 | 第40-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 综述 | 第53-60页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |