摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
前言 | 第12-15页 |
1. 研究背景 | 第12页 |
2. 研究现状 | 第12-15页 |
2.1 细胞重编程 | 第12页 |
2.2 Wnt信号通路与体细胞重编程 | 第12-13页 |
2.3 成体干细胞标记物LGR5 | 第13页 |
2.4 LGR5和RSPO3 | 第13-15页 |
材料和方法 | 第15-34页 |
1.材料 | 第15-20页 |
1.1 实验动物 | 第15页 |
1.2 实验细胞 | 第15页 |
1.3 实验质粒 | 第15-16页 |
1.4 实验试剂与培养基 | 第16-18页 |
1.5 实验耗材与仪器 | 第18-20页 |
2.方法 | 第20-34页 |
2.1 实验细胞获取 | 第20-21页 |
2.2 iPSC多能性鉴定-碱性磷酸酶染色 | 第21页 |
2.3 检测基因表达情况和定位 | 第21-25页 |
2.4 基因表达载体的构建 | 第25-29页 |
2.5.病毒组装与感染 | 第29-30页 |
2.6 蛋白与DNA相互作用检测-染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第30-31页 |
2.7 ES细胞系的建立和分化 | 第31-32页 |
2.8 ES细胞的EB分化实验 | 第32-34页 |
结果 | 第34-47页 |
1.基因Lgr5和Rspo3的表达情况 | 第34-36页 |
2.基因过表达载体构建 | 第36页 |
3.Rspo3在小鼠胚胎成纤维细胞中过表达影响细胞增殖 | 第36-38页 |
4.Lgr5/Lgr4/Rspo3在体细胞重编程中作用探究 | 第38-40页 |
5.Lgr5和Rspo3过表达对小鼠胚胎干细胞的作用和影响 | 第40-47页 |
讨论 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
综述 | 第53-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |
致谢 | 第60-61页 |