摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-17页 |
1.1 叶酸类微营养素对基因表达的影响 | 第10-12页 |
1.2 hTERT结构功能及其表达调控 | 第12-14页 |
1.3 hMLH1结构功能及其表达调控 | 第14-17页 |
第二章 不同还原态叶酸对hMLH1和hTERT基因转录表达的影响 | 第17-27页 |
2.1 实验材料与干预设计 | 第17-19页 |
2.1.1 细胞株 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 干预浓度与干预培养基配置 | 第18-19页 |
2.2 细胞干预及总RNA提取 | 第19-20页 |
2.2.1 细胞干预培养 | 第19页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第19-20页 |
2.3 RT-qPCR检测hMLH1和hTERT转录表达 | 第20-27页 |
2.3.1 反转录 | 第20-21页 |
2.3.2 引物设计与RT-q PCR | 第21-23页 |
2.3.2.1 hTERT基因引物设计与验证 | 第21-23页 |
2.3.2.2 hMLH1引物序列 | 第23页 |
2.3.2.3 内参筛选 | 第23页 |
2.3.3 RT-q PCR及其检测方法 | 第23-25页 |
2.3.4 数据统计 | 第25-27页 |
第三章 实验结果 | 第27-43页 |
3.1 不同还原态叶酸对A375和BJ细胞株hTERT转录表达的影响 | 第27-34页 |
3.1.1 RT-q PCR预实验结果 | 第27-30页 |
3.1.2 A375细胞株hTERT mRNA表达量 | 第30-33页 |
3.1.3 不同还原态叶酸对A375 hTERT转录表达的时间效应 | 第33-34页 |
3.2 不同还原态叶酸对A375 hMLH1转录表达的影响 | 第34-38页 |
3.2.1 A375 hMLH1转录表达量 | 第34-35页 |
3.2.2 不同还原态叶酸对A375 hMLH1转录表达的影响 | 第35-37页 |
3.2.3 不同还原态叶酸对A375 hMLH1转录表达的时间效应 | 第37-38页 |
3.3 不同还原态叶酸对BJ hMLH1转录表达的影响 | 第38-43页 |
3.3.1 BJ h MLH1转录表达量 | 第38-39页 |
3.3.2 不同还原态叶酸对BJ hMLH1转录表达的影响 | 第39-41页 |
3.3.3 不同还原态叶酸对BJ hMLH1转录表达的时间效应 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录A 主要仪器 | 第50-51页 |
附录B 自配试剂和溶液配方 | 第51-55页 |
附录C hTERT基因扩增产物序列 | 第55-56页 |
附录D 人hTERT基因cDNA序列 | 第56-58页 |
附录E 文献综述 | 第58-67页 |
参考文献 | 第65-67页 |
攻读学位期间完成的学术论文和研究成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |