| 摘要 | 第3-5页 |
| Summary | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 日本血吸虫概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 日本血吸虫生活史 | 第11页 |
| 1.1.2 日本血吸虫病 | 第11-12页 |
| 1.1.3 日本血吸虫病的诊断 | 第12-13页 |
| 1.1.4 日本血吸虫病的治疗与防治 | 第13页 |
| 1.2 胰岛素样多肽概述 | 第13-17页 |
| 1.2.1 胰岛素样多肽基因的结构特征 | 第14页 |
| 1.2.2 胰岛素样多肽的生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.2.3 无脊椎动物中ILP研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 胰岛素样生长因子结合蛋白概述 | 第17-18页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 日本血吸虫Sj-ILP基因的克隆及序列分析 | 第19-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-22页 |
| 2.1.1 虫株、菌株及试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 培养基及溶液 | 第20页 |
| 2.1.4 引物的设计与合成 | 第20页 |
| 2.1.5 日本血吸虫总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.1.6 cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.1.7 Sj-ILP基因的扩增 | 第21-22页 |
| 2.1.8 Sj-ILP生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2 结果 | 第22-26页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 Sj-ILP基因的扩增与测序 | 第22-23页 |
| 2.2.3 Sj-ILP生物信息学分析 | 第23-26页 |
| 2.2.3.1 理化性质分析 | 第23页 |
| 2.2.3.2 信号肽预测 | 第23-24页 |
| 2.2.3.3 结构分析 | 第24-25页 |
| 2.2.3.4 三级结构预测 | 第25页 |
| 2.2.3.5 系统进化树分析 | 第25-26页 |
| 2.3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 日本血吸虫Sj-ILP真核表达及其免疫组化研究 | 第28-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-34页 |
| 3.1.1 载体、菌株与实验动物 | 第28页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 3.1.4 相关溶液的配制 | 第29页 |
| 3.1.5 构建重组质粒 | 第29-30页 |
| 3.1.6 重组质粒的线性化及感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 3.1.7 电转化与菌落筛选 | 第30-31页 |
| 3.1.8 重组蛋白的诱导表达与鉴定 | 第31页 |
| 3.1.9 多克隆抗体的制备及免疫组化 | 第31-34页 |
| 3.1.9.1 制备合成肽 | 第31页 |
| 3.1.9.2 多肽的免疫 | 第31-32页 |
| 3.1.9.3 测定血清效价 | 第32页 |
| 3.1.9.4 抗体特异性检测 | 第32-33页 |
| 3.1.9.5 免疫组化分析 | 第33-34页 |
| 3.2 结果 | 第34-37页 |
| 3.2.1 重组质粒的线性化 | 第34页 |
| 3.2.2 Sj-ILP重组蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3.2.3 Sj-ILP重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.4 血清效价的测定 | 第36页 |
| 3.2.5 特异性多肽的免疫原性分析 | 第36-37页 |
| 3.2.6 组织定位观察 | 第37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 Sj-IGFBP与Sj-ILP、人胰岛素（HI）互作研究 | 第39-49页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-44页 |
| 4.1.1 载体和细胞 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 4.1.4 相关溶液的配制 | 第40页 |
| 4.1.5 人工合成HI基因 | 第40页 |
| 4.1.6 重组质粒的构建 | 第40-43页 |
| 4.1.7 重组质粒转染CHO细胞 | 第43页 |
| 4.1.8 间接免疫荧光实验 | 第43-44页 |
| 4.1.9 Co-IP检测相互作用实验 | 第44页 |
| 4.2 结果 | 第44-47页 |
| 4.2.1 重组质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
| 4.2.2 间接免疫荧光鉴定重组质粒的表达 | 第45页 |
| 4.2.3 重组蛋白共聚焦鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.4 重组蛋白Co-IP鉴定 | 第46-47页 |
| 4.3. 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58-59页 |
| 导师简介 | 第59-60页 |
