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基于磷酸化蛋白质组学苹果砧木干旱胁迫响应的分子机理研究

摘要第2-4页
Summary第4-5页
第一章 文献综述第8-29页
    1.1 植物抗旱机制的研究进展第8-20页
        1.1.1 植物的抗旱性第8-10页
        1.1.2 避旱性相关机制第10-13页
        1.1.3 耐旱性相关机制第13-15页
        1.1.4 抗旱性的分子基础第15-19页
        1.1.5 作物抗旱性的遗传改良第19-20页
    1.2 磷酸化蛋白质组学研究进展第20-28页
        1.2.1 磷酸化蛋白质组学的研究意义第20-22页
        1.2.2 磷酸化蛋白质组学的研究方法与技术手段第22-25页
        1.2.3 磷酸化蛋白质组学在植物干旱胁迫研究中的应用第25-28页
    1.3 本研究的依据与意义第28-29页
第二章 苹果两个基因型砧木幼苗对干旱胁迫的生理生化响应第29-43页
    2.1 材料与方法第29-31页
        2.1.1 试验材料与干旱处理第29-30页
        2.1.2 生理生化测定与方法第30-31页
        2.1.3 数据处理与分析第31页
    2.2 结果与分析第31-38页
        2.2.1 干旱胁迫下基质相对含水量与叶片相对含水量的变化第31-32页
        2.2.2 干旱胁迫对可溶性糖、可溶性蛋白与游离脯氨酸含量的影响第32-33页
        2.2.3 干旱胁迫对丙二醛含量的影响第33-34页
        2.2.4 干旱胁迫对抗氧化酶活性的影响第34-35页
        2.2.5 干旱胁迫对谷胱甘肽还原酶活性、抗坏血酸与谷胱甘肽(还原型、氧化型)含量变化的影响第35-37页
        2.2.6 干旱胁迫对碳氮代谢相关酶活性的影响第37-38页
    2.3 讨论第38-41页
        2.3.1 苹果两个基因型砧木土壤与叶片水分对干旱胁迫的响应第38-39页
        2.3.2 苹果两个基因型砧木渗透调节物质对干旱胁迫的响应第39页
        2.3.3 苹果两个基因型砧木活性氧清除系统对干旱胁迫的影响第39-41页
        2.3.4 苹果两个基因型砧木碳氮代谢相关酶类对干旱胁迫的影响第41页
    2.4 小结第41-43页
第三章 磷酸化蛋白质组鉴定与分析苹果两个基因型砧木叶片干旱诱导磷酸化蛋白第43-77页
    3.1 材料与方法第44-50页
        3.1.1 植物材料与干旱处理第44页
        3.1.2 试验设计流程第44页
        3.1.3 叶片蛋白质的提取第44-46页
        3.1.4 SDS-PAGE电泳第46页
        3.1.5 蛋白质的消化与 4-plex iTRAQ标记第46页
        3.1.6 TiO_2柱富集磷酸化肽第46-47页
        3.1.7 nanoLC-ESI-MS/MS串联质谱分析第47页
        3.1.8 叶片总RNA的提取及cDNA的合成第47页
        3.1.9 引物设计第47-49页
        3.1.10 实时定量PCR(qRT-PCR)扩增第49页
        3.1.11 数据分析第49-50页
        3.1.12 生物信息学分析第50页
    3.2 结果与分析第50-69页
        3.2.1 两个基因型苹果砧木叶片干旱胁迫磷酸化蛋白与磷酸化位点鉴定第50-52页
        3.2.2 两个基因型内磷酸化水平显著变化蛋白的鉴定第52-53页
        3.2.3 PLSC磷酸化蛋白的GO分析第53-59页
        3.2.4 细胞骨架调控磷酸化蛋白第59-61页
        3.2.5 碳氮代谢调控磷酸化蛋白第61-62页
        3.2.6 磷酸化蛋白基序的鉴定第62-63页
        3.2.7 响应干旱胁迫蛋白激酶的分析第63页
        3.2.8 PLSC磷酸化蛋白的qRT-PCR验证第63-69页
    3.3 讨论第69-76页
        3.3.1 两个基因型叶片磷酸化位点的保守性第69页
        3.3.2 蛋白激酶与干旱胁迫信号转导第69-70页
        3.3.3 参与细胞骨架功能磷酸化蛋白对干旱胁迫的响应第70页
        3.3.5 与干旱胁迫相关代谢功能的调控第70-72页
        3.3.6 与干旱胁迫下叶片衰老相关功能的调控第72-73页
        3.3.7 对干旱胁迫响应的磷酸化机制第73页
        3.3.8 山定子对干旱胁迫响应的碳氮代谢机制第73页
        3.3.9 PLSC磷酸化蛋白在mRNA水平的表达第73-76页
    3.4 小结第76-77页
第四章 苹果两个基因型砧木间差异磷酸化蛋白的鉴定与分析第77-84页
    4.1 材料与方法第77页
        4.1.1 材料与处理第77页
        4.1.2 磷酸化蛋白质鉴定方法第77页
        4.1.3 数据分析第77页
    4.2 结果与分析第77-82页
        4.2.1 M26与山定子磷酸化蛋白于基因型间抗旱的差异分析第77-81页
        4.2.2 M26与山定子磷酸化蛋白于基因型间GO分析第81-82页
    4.3 讨论第82-83页
        4.3.1 两个基因型间抗旱蛋白磷酸化机制的相同性第82页
        4.3.2 两个基因型间抗旱蛋白磷酸化机制的差异性第82-83页
    4.4 小结第83-84页
第五章 结论第84-85页
参考文献第85-106页
附录第106-108页
致谢第108-109页
导师简介第109-110页
作者简介第110-111页

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