| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-37页 |
| 1.1 环境污染与环境微生物 | 第10-11页 |
| 1.2 微生物对环境污染物的抗性 | 第11-13页 |
| 1.3 微生物的共选择现象（Co-selection） | 第13-24页 |
| 1.3.1 共抗性的产生和发现 | 第13-14页 |
| 1.3.2 重金属污染的主要来源 | 第14-18页 |
| 1.3.3 重金属对细胞的毒性 | 第18页 |
| 1.3.4 共选择机制 | 第18-22页 |
| 1.3.5 环境中的共选择现象 | 第22-24页 |
| 1.4 金黄色葡萄球菌共抗性机制研究 | 第24-31页 |
| 1.4.1 染色体编码的MDR外排泵系统 | 第26-29页 |
| 1.4.2 质粒编码的MDR外排泵 | 第29-31页 |
| 1.5 共抗性的调节机制研究 | 第31-35页 |
| 1.5.1 全局调控因子 | 第31-33页 |
| 1.5.2 特殊调节子 | 第33-34页 |
| 1.5.3 外排泵在S. aureus共抗性上的作用 | 第34-35页 |
| 1.6 本实验的主要目的和重要意义 | 第35页 |
| 1.7 本研究的特色与可行性分析 | 第35-37页 |
| 第二章 金黄色葡萄球菌LZ-01 的分离、鉴定及抗性测定 | 第37-51页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.1.1 样地介绍 | 第37-38页 |
| 2.1.2 样品采集与处理 | 第38页 |
| 2.1.3 菌株抗性筛选 | 第38-39页 |
| 2.1.4 分离菌株的 16SrRNA序列鉴定 | 第39-42页 |
| 2.1.5 微生物抗性测定 | 第42-43页 |
| 2.1.6 诱导抗性与交叉抗性测定 | 第43-44页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第44-49页 |
| 2.2.1 抗性菌株的 16S rRNA分析 | 第44页 |
| 2.2.2 S. aureus LZ-01 菌株的抗生素抗性分析 | 第44-46页 |
| 2.2.3 S. aureus LZ-01 对各种重金属的的抗性 | 第46-47页 |
| 2.2.4 S. aureus LZ-01 诱导抗性 | 第47-48页 |
| 2.2.5 交叉配比抗性实验 | 第48-49页 |
| 2.3 实验小结 | 第49-51页 |
| 第三章 金黄色葡萄球菌LZ-01 转录组对重金属铬的响应 | 第51-61页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.1.1 菌株的活化培养 | 第51页 |
| 3.1.2 金黄色葡萄球菌LZ-01 总RNA的提取 | 第51-53页 |
| 3.1.3 反转录与测序 | 第53-54页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第54-60页 |
| 3.2.1 基因表达量的变化 | 第54-55页 |
| 3.2.2 重金属抗性相关基因表达量的变化 | 第55-58页 |
| 3.2.3 抗生素抗性相关基因表达量的变化 | 第58-60页 |
| 3.3 实验小结 | 第60-61页 |
| 第四章 金黄色葡萄球菌LZ-01 中参与抗生素与重金属共抗性基因的筛选 | 第61-83页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第61-68页 |
| 4.1.1 参与重金属铬抗性的基因筛选 | 第61-63页 |
| 4.1.2 参与抗生素抗性的主要基因筛选 | 第63-66页 |
| 4.1.3 qPCR法验证抗生素抗性基因 | 第66-68页 |
| 4.2 实验结果与分析 | 第68-82页 |
| 4.2.1 qPCR引物设计与引物效率验证 | 第68-75页 |
| 4.2.2 氨苄压力下抗性基因表达量的变化 | 第75-78页 |
| 4.2.3 共抗性相关基因的筛选 | 第78-82页 |
| 4.3 实验小结 | 第82-83页 |
| 第五章 基因敲除法验证金黄色葡萄球菌LZ-01 中共抗性基因的功能 | 第83-105页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第83-98页 |
| 5.1.1 同源重组质粒的构建 | 第85-90页 |
| 5.1.2 回补质粒的构建 | 第90-93页 |
| 5.1.3 电击转化条件的优化 | 第93页 |
| 5.1.4emrA/B基因的敲除与回补 | 第93-97页 |
| 5.1.5 突变株抗性变化测定 | 第97-98页 |
| 5.2 实验结果与分析 | 第98-103页 |
| 5.2.1 金葡LZ-01 菌株在emrA/B敲除后的抗性变化 | 第98-100页 |
| 5.2.2 金葡LZ-01 野生菌株和emrA/B敲除突变菌株的生长行为 | 第100-101页 |
| 5.2.3 金葡LZ-01 野生菌株和emrA/B敲除突变菌株的交叉抗性 | 第101-103页 |
| 5.3 实验小结 | 第103-105页 |
| 第六章 金黄色葡萄球菌LZ-01 中共抗性基因emrAB的调节机制探究 | 第105-131页 |
| 6.1 实验材料与方法 | 第105-118页 |
| 6.1.1 基因emrA/B预测的调控机制 | 第105页 |
| 6.1.2 基因emrA/B预测的调控蛋白 | 第105页 |
| 6.1.3 基因emrA/B启动子的验证 | 第105-108页 |
| 6.1.4 MarR蛋白对基因emrA/B的调控作用 | 第108-109页 |
| 6.1.5 emrA/B的外源表达与蛋白结构分析 | 第109-118页 |
| 6.2 实验结果与分析 | 第118-130页 |
| 6.2.1 emrAB基因的启动子结构 | 第118-120页 |
| 6.2.2 重金属铬和抗生素氨苄青霉素对emrAB基因启动子Pemr的诱导作用 | 第120-121页 |
| 6.2.3 MarR蛋白对emrAB基因启动子Pemr的调控作用 | 第121-122页 |
| 6.2.4 EmrAB蛋白的结构分析 | 第122-130页 |
| 6.3 实验小结 | 第130-131页 |
| 第七章 实验讨论 | 第131-138页 |
| 第八章 展望 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-156页 |
| 在读期间参与发表的论文 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157页 |
